एडीस इजिप्ती (डिप्टेरा: क्युलिसीडे) विरुद्ध लार्विसिडल आणि प्रौढ उपाय म्हणून वनस्पतींच्या आवश्यक तेलांवर आधारित टेरपीन संयुगेचे संयोजन

Nature.com ला भेट दिल्याबद्दल धन्यवाद.तुम्ही वापरत असलेल्या ब्राउझरच्या आवृत्तीमध्ये मर्यादित CSS सपोर्ट आहे.सर्वोत्तम परिणामांसाठी, आम्ही शिफारस करतो की तुम्ही तुमच्या ब्राउझरची नवीन आवृत्ती वापरा (किंवा इंटरनेट एक्सप्लोररमध्ये सुसंगतता मोड अक्षम करा).दरम्यान, चालू असलेल्या समर्थनाची खात्री करण्यासाठी, आम्ही स्टाईल किंवा JavaScript शिवाय साइट दाखवत आहोत.
वनस्पती-व्युत्पन्न कीटकनाशक यौगिकांचे संयोजन कीटकांविरूद्ध समन्वयात्मक किंवा विरोधी परस्परसंवाद दर्शवू शकतात.एडीस डासांमुळे होणारा रोगांचा झपाट्याने प्रसार आणि एडीस डासांच्या लोकसंख्येचा पारंपारिक कीटकनाशकांना होणारा वाढता प्रतिकार लक्षात घेता, वनस्पतींच्या आवश्यक तेलांवर आधारित टेरपीन संयुगेचे अठ्ठावीस संयोजन तयार केले गेले आणि एडीस इजिप्तीच्या लार्व्हा आणि प्रौढ अवस्थेविरुद्ध चाचणी केली गेली.पाच वनस्पती अत्यावश्यक तेले (EOs) चे सुरुवातीला त्यांच्या लार्व्हिसिडल आणि प्रौढ-वापराच्या कार्यक्षमतेसाठी मूल्यांकन केले गेले आणि GC-MS परिणामांवर आधारित प्रत्येक EO मध्ये दोन प्रमुख संयुगे ओळखण्यात आले.डायलिल डायसल्फाइड, डायलिल ट्रायसल्फाइड, कार्व्होन, लिमोनेन, युजेनॉल, मिथाइल युजेनॉल, युकॅलिप्टोल, युडेस्मॉल आणि मच्छर अल्फा-पाइनेन ही मुख्य ओळखलेली संयुगे खरेदी केली गेली.या संयुगांचे बायनरी संयोजन नंतर सबलेथल डोस वापरून तयार केले गेले आणि त्यांचे सहक्रियात्मक आणि विरोधी प्रभाव तपासले गेले आणि निर्धारित केले गेले.डायलिल डायसल्फाइडमध्ये लिमोनिन मिसळून सर्वोत्कृष्ट लार्व्हिसाइडल रचना मिळवल्या जातात आणि लिमोनिनमध्ये कार्व्होन मिसळून सर्वोत्तम ॲडल्टिसाइडल रचना मिळवल्या जातात.व्यावसायिकरित्या वापरल्या जाणाऱ्या सिंथेटिक लार्व्हिसाइड टेम्फॉस आणि मॅलाथिऑन या प्रौढ औषधाची स्वतंत्रपणे आणि बायनरी संयोजनात टेरपेनॉइड्ससह चाचणी केली गेली.परिणामांवरून असे दिसून आले की टेमेफॉस आणि डायलिल डायसल्फाइड आणि मॅलेथिऑन आणि युडेसमॉल यांचे संयोजन सर्वात प्रभावी संयोजन होते.हे शक्तिशाली संयोजन एडीस इजिप्ती विरुद्ध वापरण्याची क्षमता ठेवतात.
वनस्पती आवश्यक तेले (EOs) हे दुय्यम चयापचय आहेत ज्यात विविध बायोएक्टिव्ह संयुगे आहेत आणि कृत्रिम कीटकनाशकांना पर्याय म्हणून ते अधिकाधिक महत्त्वाचे होत आहेत.ते केवळ पर्यावरणास अनुकूल आणि वापरकर्त्यासाठी अनुकूल नाहीत तर ते वेगवेगळ्या जैव सक्रिय संयुगांचे मिश्रण देखील आहेत, ज्यामुळे औषध प्रतिरोधक क्षमता विकसित होण्याची शक्यता कमी होते.GC-MS तंत्रज्ञानाचा वापर करून, संशोधकांनी विविध वनस्पतींच्या आवश्यक तेलांच्या घटकांचे परीक्षण केले आणि 17,500 सुगंधी वनस्पतींमधून 3,000 पेक्षा जास्त संयुगे ओळखले 2, त्यापैकी बहुतेक कीटकनाशक गुणधर्मांसाठी तपासले गेले आणि कीटकनाशक प्रभाव 3,4 असल्याचे नोंदवले गेले.काही अभ्यासांनी असे ठळक केले आहे की कंपाऊंडच्या मुख्य घटकाची विषाक्तता त्याच्या क्रूड इथिलीन ऑक्साईड सारखी किंवा जास्त असते.परंतु रासायनिक कीटकनाशके 5,6 प्रमाणेच वैयक्तिक संयुगे वापरल्यास प्रतिकारशक्तीच्या विकासासाठी पुन्हा जागा सोडू शकते.त्यामुळे, कीटकनाशकाची प्रभावीता सुधारण्यासाठी आणि लक्ष्यित कीटकांच्या लोकसंख्येमध्ये प्रतिकार होण्याची शक्यता कमी करण्यासाठी इथिलीन ऑक्साईड-आधारित संयुगेचे मिश्रण तयार करण्यावर सध्याचा भर आहे.EO मध्ये उपस्थित वैयक्तिक सक्रिय संयुगे EO च्या एकूण क्रियाकलापांना प्रतिबिंबित करणाऱ्या संयोगांमध्ये समन्वयात्मक किंवा विरोधी प्रभाव प्रदर्शित करू शकतात, ही वस्तुस्थिती मागील संशोधकांनी केलेल्या अभ्यासात 7,8 द्वारे चांगल्या प्रकारे जोर देण्यात आली आहे.वेक्टर कंट्रोल प्रोग्राममध्ये EO आणि त्याचे घटक देखील समाविष्ट आहेत.क्युलेक्स आणि ॲनोफिलीस डासांवर आवश्यक तेलांच्या मच्छरनाशक क्रियाकलापांचा विस्तृत अभ्यास केला गेला आहे.एकूणच विषारीपणा वाढवण्यासाठी आणि दुष्परिणाम कमी करण्यासाठी व्यावसायिकरित्या वापरल्या जाणाऱ्या कृत्रिम कीटकनाशकांसह विविध वनस्पती एकत्र करून प्रभावी कीटकनाशके विकसित करण्याचा प्रयत्न अनेक अभ्यासांनी केला आहे9.परंतु एडिस इजिप्ती विरुद्ध अशा संयुगांचा अभ्यास दुर्मिळ आहे.वैद्यकीय विज्ञानातील प्रगती आणि औषधे आणि लसींच्या विकासामुळे काही वेक्टर-जनित रोगांचा सामना करण्यास मदत झाली आहे.परंतु एडिस इजिप्ती डासाद्वारे प्रसारित होणाऱ्या विषाणूच्या विविध सेरोटाइपच्या उपस्थितीमुळे लसीकरण कार्यक्रम अयशस्वी झाला आहे.म्हणून, जेव्हा असे रोग उद्भवतात तेव्हा रोगाचा प्रसार रोखण्यासाठी वेक्टर नियंत्रण कार्यक्रम हा एकमेव पर्याय आहे.सध्याच्या परिस्थितीत, एडिस इजिप्तीचे नियंत्रण हे खूप महत्वाचे आहे कारण ते विविध विषाणू आणि त्यांच्या सीरोटाइपमुळे डेंग्यू ताप, झिका, डेंग्यू हेमोरेजिक ताप, पिवळा ताप इ.चे प्रमुख वाहक आहे. सर्वात उल्लेखनीय गोष्ट म्हणजे ही संख्या आहे. इजिप्तमध्ये जवळजवळ सर्व वेक्टर-जनित एडिस-जनित रोगांची प्रकरणे दरवर्षी वाढत आहेत आणि जगभरात वाढत आहेत.म्हणून, या संदर्भात, एडिस इजिप्ती लोकसंख्येसाठी पर्यावरणास अनुकूल आणि प्रभावी नियंत्रण उपाय विकसित करण्याची नितांत गरज आहे.या संदर्भात संभाव्य उमेदवार ईओ, त्यांचे घटक संयुगे आणि त्यांचे संयोजन आहेत.म्हणून, या अभ्यासात कीटकनाशक गुणधर्म असलेल्या (म्हणजे मिंट, होली बेसिल, युकॅलिप्टस स्पॉटेड, ॲलियम सल्फर आणि मेलेलुका) पाच वनस्पतींमधून मुख्य वनस्पती EO संयुगेचे प्रभावी संयोजन ओळखण्याचा प्रयत्न केला गेला.
सर्व निवडलेल्या EO ने 0.42 ते 163.65 ppm पर्यंत 24-h LC50 सह एडिस इजिप्ती विरुद्ध संभाव्य लार्व्हिसाइडल क्रियाकलाप प्रदर्शित केले.पेपरमिंट (एमपी) ईओ साठी 24 तासात 0.42 पीपीएमच्या LC50 मूल्यासह सर्वोच्च अळीनाशक क्रिया नोंदवली गेली, त्यानंतर 24 तास (टेबल 1) वाजता 16.19 पीपीएम LC50 मूल्यासह लसूण (एएस) होते.
Ocimum Sainttum, Os EO वगळता, इतर सर्व चार स्क्रीन केलेल्या EO ने 24-तासांच्या एक्सपोजर कालावधीत 23.37 ते 120.16 ppm पर्यंत एलसी50 मूल्यांसह स्पष्ट ऍलर्जीड प्रभाव दर्शविला.24 तासांच्या आत 23.37 पीपीएम LC50 मूल्य असलेल्या प्रौढांना मारण्यासाठी थायमोफिलस स्ट्रियाटा (सीएल) ईओ सर्वात प्रभावी होता, त्यानंतर युकॅलिप्टस मॅक्युलाटा (ईएम) ज्याचे एलसी50 मूल्य 101.91 पीपीएम (टेबल 1) होते.दुसरीकडे, Os साठी LC50 मूल्य अद्याप निर्धारित केले गेले नाही कारण सर्वोच्च डोसमध्ये 53% मृत्यू दर नोंदवला गेला (पूरक आकृती 3).
प्रत्येक EO मधील दोन प्रमुख घटक संयुगे NIST लायब्ररी डेटाबेस परिणाम, GC क्रोमॅटोग्राम क्षेत्र टक्केवारी आणि MS स्पेक्ट्रा परिणाम (तक्ता 2) यांच्या आधारे ओळखले गेले आणि निवडले गेले.EO As साठी, ओळखले गेलेले मुख्य संयुगे डायलिल डायसल्फाइड आणि डायलिल ट्रायसल्फाइड होते;EO Mp साठी ओळखले गेलेले मुख्य संयुगे म्हणजे carvone आणि limonene, EO Em साठी ओळखले गेलेले मुख्य संयुगे eudesmol आणि eucalyptol;EO Os साठी, ओळखण्यात आलेली मुख्य संयुगे युजेनॉल आणि मिथाइल युजेनॉल होती आणि EO Cl साठी ओळखली जाणारी मुख्य संयुगे युजेनॉल आणि α-pinene होती (आकृती 1, पूरक आकृती 5-8, पूरक तक्ता 1-5).
निवडलेल्या अत्यावश्यक तेलांच्या मुख्य टेरपेनॉइड्सच्या वस्तुमान स्पेक्ट्रोमेट्रीचे परिणाम (ए-डायलील डायसल्फाइड; बी-डायलील ट्रायसल्फाइड; सी-युजेनॉल; डी-मिथाइल युजेनॉल; ई-लिमोनेन; एफ-सुगंधी सेपेरोन; जी-α-पाइनेन; एच-सिनिओल आर-युडामोल).
एकूण नऊ संयुगे (डायलील डायसल्फाइड, डायलिल ट्रायसल्फाइड, युजेनॉल, मिथाइल युजेनॉल, कार्व्होन, लिमोनेन, युकॅलिप्टोल, युडेस्मॉल, α-पाइनेन) हे प्रभावी संयुगे म्हणून ओळखले गेले जे ईओचे मुख्य घटक आहेत आणि वैयक्तिकरित्या एडीस एजिप्टीवर जैवविरोधक म्हणून ओळखले गेले. टप्पे.24 तासांच्या एक्सपोजरनंतर 2.25 पीपीएमच्या एलसी50 मूल्यासह युडेसमॉल कंपाऊंडमध्ये सर्वात जास्त अळ्यानाशक क्रिया होती.डायलिल डायसल्फाइड आणि डायलिल ट्रायसल्फाइड यौगिकांमध्ये 10-20 पीपीएमच्या श्रेणीतील सरासरी सबलेथल डोससह संभाव्य लार्व्हिसाइडल प्रभाव असल्याचे आढळून आले आहे.63.35 ppm, 139.29 ppm च्या LC50 मूल्यांसह युजेनॉल, लिमोनेन आणि युकॅलिप्टोल या संयुगांसाठी मध्यम अळीनाशक क्रिया पुन्हा दिसून आली.आणि अनुक्रमे 24 तासांनंतर 181.33 पीपीएम (तक्ता 3).तथापि, मिथाइल युजेनॉल आणि कार्व्होनची कोणतीही लक्षणीय लार्विसिडल क्षमता अगदी उच्च डोसमध्ये देखील आढळली नाही, म्हणून LC50 मूल्यांची गणना केली गेली नाही (तक्ता 3).सिंथेटिक लार्व्हिसाईड टेमेफॉसमध्ये 24 तासांच्या एक्सपोजरमध्ये एडिस इजिप्तीच्या विरूद्ध 0.43 पीपीएमची सरासरी प्राणघातक एकाग्रता होती (तक्ता 3, पूरक तक्ता 6).
सात संयुगे (डायलील डायसल्फाइड, डायलिल ट्रायसल्फाइड, युकॅलिप्टोल, α-पाइनेन, युडेस्मॉल, लिमोनेन आणि कार्व्होन) प्रभावी EO चे मुख्य संयुगे म्हणून ओळखले गेले आणि प्रौढ इजिप्शियन एडीस डासांवर वैयक्तिकरित्या चाचणी केली गेली.प्रॉबिट रिग्रेशन विश्लेषणानुसार, युडेस्मॉलमध्ये 1.82 पीपीएमच्या एलसी50 मूल्यासह सर्वाधिक क्षमता असल्याचे आढळून आले, त्यानंतर 24-तास एक्सपोजरच्या वेळी 17.60 पीपीएमच्या एलसी50 मूल्यासह युकॅलिप्टोलचा क्रमांक लागतो.चाचणी केलेले उर्वरित पाच संयुगे 140.79 ते 737.01 पीपीएम (तक्ता 3) पर्यंत LC50 असलेल्या प्रौढांसाठी माफक प्रमाणात हानिकारक होते.सिंथेटिक ऑर्गेनोफॉस्फरस मॅलेथिओन युडेस्मॉलपेक्षा कमी शक्तिशाली आणि इतर सहा संयुगांपेक्षा जास्त, 24-तासांच्या एक्सपोजर कालावधीत LC50 मूल्य 5.44 पीपीएम (तक्ता 3, पूरक तक्ता 6).
सात शक्तिशाली शिसे संयुगे आणि ऑरगॅनोफॉस्फोरस टेमेफोसेट 1:1 च्या प्रमाणात त्यांच्या LC50 डोसचे बायनरी संयोजन तयार करण्यासाठी निवडले गेले.एकूण 28 बायनरी संयोजन तयार केले गेले आणि एडीस इजिप्ती विरूद्ध त्यांच्या लार्व्हिसिडल प्रभावीतेसाठी चाचणी केली गेली.नऊ संयोगे समन्वयवादी असल्याचे आढळले, 14 संयोग विरोधी होते आणि पाच संयोग अळीनाशक नव्हते.सिनर्जिस्टिक कॉम्बिनेशन्समध्ये, डायलिल डायसल्फाइड आणि टेमोफोलचे संयोजन सर्वात प्रभावी होते, 24 तासांनंतर 100% मृत्यू दिसून आला (तक्ता 4).त्याचप्रमाणे, डायलिल डायसल्फाइडसह लिमोनिन आणि थायमेटफॉससह युजेनॉल यांचे मिश्रण 98.3% (तक्ता 5) च्या निरीक्षण केलेल्या लार्व्हा मृत्यूसह चांगली क्षमता दर्शविते.उरलेल्या 4 संयोजनांमध्ये, जसे की युडेसमॉल अधिक युकलिप्टोल, युडेस्मॉल अधिक लिमोनेन, युकॅलिप्टोल अधिक अल्फा-पाइनेन, अल्फा-पाइनेन अधिक टेमेफॉस, देखील लक्षणीय अळ्यानाशक परिणामकारकता दर्शविते, ज्यामध्ये मृत्यूचे प्रमाण 90% पेक्षा जास्त आहे.अपेक्षित मृत्यू दर 60-75% च्या जवळ आहे.(टेबल 4).तथापि, α-pinene किंवा निलगिरीसह लिमोनेनच्या संयोगाने विरोधी प्रतिक्रिया दिसून आल्या.त्याचप्रमाणे, युजेनॉल किंवा युकॅलिप्टस किंवा युडेस्मॉल किंवा डायलिल ट्रायसल्फाइडसह टेमेफॉसचे मिश्रण विरोधी प्रभाव असल्याचे आढळून आले आहे.त्याचप्रमाणे, डायलिल डायसल्फाइड आणि डायलिल ट्रायसल्फाइड यांचे संयोजन आणि युडेस्मॉल किंवा युजेनॉल यापैकी कोणत्याही संयुगेचे संयोजन त्यांच्या लार्व्हिसाइडल क्रियेमध्ये विरोधी आहे.युजेनॉल किंवा α-पाइनेनसह युडेसमॉलच्या संयोगाने देखील विरोध नोंदवला गेला आहे.
प्रौढ अम्लीय क्रियाकलापांसाठी चाचणी केलेल्या सर्व 28 बायनरी मिश्रणांपैकी, 7 संयोजन समन्वयवादी होते, 6 परिणाम नव्हते आणि 15 विरोधी होते.युकेलिप्टससह युडेसमॉल आणि लिमोनेन आणि कार्व्होनसह लिमोनेन यांचे मिश्रण इतर सहक्रियात्मक संयोजनांपेक्षा अधिक प्रभावी असल्याचे आढळून आले, मृत्यू दर 24 तास अनुक्रमे 76% आणि 100% आहे (तक्ता 5).लिमोनिन आणि डायलिल ट्रायसल्फाइड वगळता सर्व संयुगांच्या संयोगांसह मॅलाथिऑनचा एक समन्वयात्मक प्रभाव दिसून आला आहे.दुसरीकडे, डायलिल डायसल्फाइड आणि डायलिल ट्रायसल्फाइड आणि यांपैकी एकाचे युकलिप्टस, किंवा नीलगिरी, किंवा कार्व्होन, किंवा लिमोनेन यांच्यात वैरभाव आढळून आला आहे.त्याचप्रमाणे, α-pinene बरोबर eudesmol किंवा limonene, eucalyptol with carvone किंवा limonene आणि eudesmol किंवा malathion बरोबर लिमोनेन यांच्या संयोगाने विरोधी लार्व्हिसाइडल प्रभाव दिसून आला.उरलेल्या सहा संयोगांसाठी, अपेक्षित आणि निरीक्षण मृत्युदर (तक्ता 5) मध्ये कोणताही महत्त्वाचा फरक नव्हता.
सिनेर्जिस्टिक इफेक्ट्स आणि सबलेथल डोसच्या आधारे, मोठ्या संख्येने एडिस इजिप्ती डासांच्या विरूद्ध त्यांची लार्व्हिसाइडल विषाक्तता शेवटी निवडली गेली आणि पुढील चाचणी केली गेली.परिणामांवरून असे दिसून आले की युजेनॉल-लिमोनेन, डायलिल डायसल्फाइड-लिमोनेन आणि डायलिल डायसल्फाइड-टाइमफॉस या बायनरी कॉम्बिनेशनचा वापर करून पाहिल्या गेलेल्या अळ्यांचा मृत्यू 100% होता, तर अपेक्षित अळ्यांचा मृत्यू 76.48%, 72.16% आणि 63.4% (T, 63.4%) होता..लिमोनिन आणि युडेस्मॉलचे संयोजन तुलनेने कमी प्रभावी होते, 24-तासांच्या संपर्क कालावधीत (टेबल 6) 88% लार्व्हा मृत्यूचे निरीक्षण केले गेले.सारांश, चार निवडलेल्या बायनरी संयोजनांनी मोठ्या प्रमाणावर लागू केल्यावर एडीस इजिप्ती विरुद्ध सिनेर्जिस्टिक लार्विसिडल प्रभाव देखील प्रदर्शित केला (तक्ता 6).
प्रौढ एडीस इजिप्तीच्या मोठ्या लोकसंख्येवर नियंत्रण ठेवण्यासाठी ॲडल्टोसिडल बायोॲसेसाठी तीन सिनेर्जिस्टिक संयोजन निवडले गेले.मोठ्या कीटक वसाहतींवर चाचणी करण्यासाठी संयोजने निवडण्यासाठी, आम्ही प्रथम कार्व्होन प्लस लिमोनिन आणि युकॅलिप्टोल प्लस युडेसमॉल या दोन सर्वोत्तम सिनर्जिस्टिक टेरपीन संयोजनांवर लक्ष केंद्रित केले.दुसरे म्हणजे, सिंथेटिक ऑरगॅनोफॉस्फेट मॅलेथिओन आणि टेरपेनॉइड्सच्या संयोगातून सर्वोत्कृष्ट सहक्रियात्मक संयोजन निवडले गेले.आमचा असा विश्वास आहे की मॅलेथिऑन आणि युडेसमॉलचे संयोजन हे सर्वात जास्त निरीक्षण केलेल्या मृत्यू आणि उमेदवार घटकांच्या अत्यंत कमी LC50 मूल्यांमुळे मोठ्या कीटक वसाहतींवर चाचणीसाठी सर्वोत्तम संयोजन आहे.मॅलाथिऑन α-pinene, diallyl disulfide, eucalyptus, carvone आणि eudesmol च्या संयोगाने सहक्रियाशीलता प्रदर्शित करते.परंतु जर आपण LC50 मूल्ये पाहिली तर, Eudesmol चे सर्वात कमी मूल्य (2.25 ppm) आहे.मॅलेथिऑन, α-पाइनेन, डायलिल डायसल्फाइड, युकॅलिप्टोल आणि कार्व्होनची गणना केलेली LC50 मूल्ये 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 आणि 140.79 ppm होती.अनुक्रमेही मूल्ये सूचित करतात की मॅलेथिऑन आणि युडेस्मॉलचे संयोजन डोसच्या दृष्टीने इष्टतम संयोजन आहे.परिणामांवरून असे दिसून आले की कार्व्होन प्लस लिमोनिन आणि युडेस्मॉल प्लस मॅलेथिऑनच्या संयोगाने 61% ते 65% च्या अपेक्षित मृत्यूच्या तुलनेत 100% मृत्यूचे निरीक्षण केले गेले.60% च्या अपेक्षित मृत्यू दराच्या तुलनेत, 24 तासांच्या संपर्कात आल्यानंतर, eudesmol plus eucalyptol, आणखी एक संयोजनाने 78.66% मृत्यू दर दर्शविला.प्रौढ एडीस इजिप्ती (तक्ता 6) विरुद्ध मोठ्या प्रमाणावर लागू केले तरीही तिन्ही निवडक संयोजनांनी सहक्रियात्मक प्रभाव दर्शविला.
या अभ्यासात, Mp, As, Os, Em आणि Cl सारख्या निवडलेल्या वनस्पती EO ने एडीस इजिप्तीच्या लार्व्हा आणि प्रौढ अवस्थेवर आशादायक घातक परिणाम दाखवले.Mp EO मध्ये LC50 मूल्य 0.42 ppm सह सर्वाधिक लार्विसिडल क्रियाकलाप होते, त्यानंतर 24 तासांनंतर 50 ppm पेक्षा कमी LC50 मूल्यासह As, Os आणि Em EO आहेत.हे परिणाम डास आणि इतर डिप्टेरस माशी 10,11,12,13,14 च्या मागील अभ्यासाशी सुसंगत आहेत.24 तासांनंतर LC50 मूल्य 163.65 ppm सह Cl ची लार्व्हिसाइडल क्षमता इतर आवश्यक तेलांपेक्षा कमी असली तरी, 24 तासांनंतर LC50 मूल्य 23.37 ppm सह त्याची प्रौढ क्षमता सर्वाधिक आहे.Mp, As आणि Em EOs ने LC50 मूल्यांसह 24 तासांच्या एक्सपोजरमध्ये 100-120 पीपीएमच्या श्रेणीत चांगली ऍलर्जीडल क्षमता दर्शविली, परंतु त्यांच्या लार्व्हिसाइडल परिणामकारकतेपेक्षा ते तुलनेने कमी होते.दुसरीकडे, EO Os ने सर्वोच्च उपचारात्मक डोसवर देखील नगण्य ऍलर्जीडल प्रभाव दर्शविला.अशा प्रकारे, परिणाम सूचित करतात की इथिलीन ऑक्साईडची वनस्पतींमध्ये विषारीता डासांच्या विकासाच्या टप्प्यावर अवलंबून बदलू शकते.हे कीटकांच्या शरीरात EO च्या प्रवेशाचा दर, विशिष्ट लक्ष्य एन्झाइम्ससह त्यांचा परस्परसंवाद आणि प्रत्येक विकासाच्या टप्प्यावर डासांची डिटॉक्सिफिकेशन क्षमता यावर देखील अवलंबून असते.मोठ्या संख्येने अभ्यासातून असे दिसून आले आहे की मुख्य घटक कंपाऊंड हे इथिलीन ऑक्साईडच्या जैविक क्रियेतील एक महत्त्वाचा घटक आहे, कारण एकूण संयुगे 3,12,17,18 पैकी बहुतांश भाग आहे.म्हणून, आम्ही प्रत्येक EO मध्ये दोन मुख्य संयुगे मानले.GC-MS परिणामांवर आधारित, diallyl disulfide आणि diallyl trisulfide हे EO As चे प्रमुख संयुगे म्हणून ओळखले गेले, जे मागील अहवाल 19,20,21 शी सुसंगत आहे.जरी मागील अहवालात मेन्थॉल हे त्याच्या मुख्य संयुगांपैकी एक असल्याचे सूचित केले गेले असले तरी, कार्व्होन आणि लिमोनेन पुन्हा Mp EO22,23 चे मुख्य संयुगे म्हणून ओळखले गेले.Os EO च्या रचना प्रोफाइलने दर्शविले की युजेनॉल आणि मिथाइल युजेनॉल हे मुख्य संयुगे आहेत, जे पूर्वीच्या 16,24 संशोधकांच्या निष्कर्षांसारखे आहेत.Eucalyptol आणि eucalyptol हे एम लीफ ऑइलमध्ये उपस्थित असलेले मुख्य संयुगे म्हणून नोंदवले गेले आहेत, जे काही संशोधकांच्या निष्कर्षांशी सुसंगत आहे 25,26 परंतु ओलालेड एट अल.27 च्या निष्कर्षांच्या विरुद्ध आहे.मेलेलुका आवश्यक तेलामध्ये सिनेओल आणि α-पाइनेनचे वर्चस्व दिसून आले, जे मागील अभ्यासांसारखेच आहे 28,29.वेगवेगळ्या ठिकाणी एकाच वनस्पतीच्या प्रजातींमधून काढलेल्या अत्यावश्यक तेलांच्या रचना आणि एकाग्रतेमध्ये अंतर्विशिष्ट फरक नोंदवले गेले आहेत आणि या अभ्यासात देखील आढळून आले आहेत, जे भौगोलिक वनस्पतींच्या वाढीची परिस्थिती, कापणीची वेळ, विकासाची अवस्था किंवा वनस्पतींचे वय यावर प्रभाव टाकतात.केमोटाइप इ.चे स्वरूप 22,30,31,32.नंतर ओळखल्या गेलेल्या मुख्य संयुगे विकत घेण्यात आल्या आणि त्यांच्या लार्व्हिसाइडल प्रभावासाठी आणि प्रौढ एडीस इजिप्ती डासांवर होणाऱ्या प्रभावांसाठी तपासण्यात आले.परिणामांवरून असे दिसून आले की डायलिल डायसल्फाइडची लार्विसिडल क्रिया क्रूड ईओ एएसच्या तुलनेत होती.परंतु डायलिल ट्रायसल्फाइडची क्रिया EO As पेक्षा जास्त आहे.हे परिणाम Kimbaris et al द्वारे प्राप्त केलेल्या परिणामांसारखेच आहेत.क्युलेक्स फिलीपिन्सवर 33.तथापि, या दोन संयुगांनी लक्ष्यित डासांच्या विरूद्ध चांगली स्वयंनाशक क्रिया दर्शविली नाही, जी टेनेब्रिओ मोलिटरवरील Plata-Rueda et al 34 च्या परिणामांशी सुसंगत आहे.Os EO एडीस इजिप्तीच्या लार्व्हा अवस्थेविरुद्ध प्रभावी आहे, परंतु प्रौढ अवस्थेविरुद्ध नाही.हे स्थापित केले गेले आहे की मुख्य वैयक्तिक संयुगेची लार्विसिडल क्रियाकलाप क्रूड Os EO पेक्षा कमी आहे.हे इतर संयुगे आणि क्रूड इथिलीन ऑक्साईडमधील त्यांच्या परस्परसंवादाची भूमिका सूचित करते.एकट्या मिथाइल युजेनॉलमध्ये नगण्य क्रिया असते, तर एकट्या युजेनॉलमध्ये मध्यम अळीनाशक क्रिया असते.हा निष्कर्ष एकीकडे, 35,36 पुष्टी करतो आणि दुसरीकडे, पूर्वीच्या संशोधकांच्या 37,38 निष्कर्षांचा विरोधाभास करतो.युजेनॉल आणि मेथिल्यूजेनॉलच्या कार्यात्मक गटांमधील फरकांमुळे एकाच लक्ष्यित कीटकांना भिन्न विषारीपणा येऊ शकतो.लिमोनिनमध्ये मध्यम अळीनाशक क्रिया असल्याचे आढळून आले, तर कार्व्होनचा प्रभाव नगण्य होता.त्याचप्रमाणे, प्रौढ कीटकांसाठी लिमोनिनची तुलनेने कमी विषारीता आणि कार्व्होनची उच्च विषाक्तता काही मागील अभ्यासांच्या परिणामांना समर्थन देतात40 परंतु इतरांना विरोध करतात41.इंट्रासायक्लिक आणि एक्सोसायक्लिक दोन्ही स्थानांवर दुहेरी बंधांची उपस्थिती या संयुगांचे लार्व्हिसाइड्स 3,41 म्हणून फायदे वाढवू शकते, तर कार्व्होन, जे असंतृप्त अल्फा आणि बीटा कार्बन असलेले केटोन आहे, प्रौढांमध्ये विषाक्तपणाची उच्च क्षमता दर्शवू शकते42.तथापि, लिमोनिन आणि कार्व्होनची वैयक्तिक वैशिष्ट्ये एकूण EO Mp (टेबल 1, तक्ता 3) पेक्षा खूपच कमी आहेत.चाचणी केलेल्या टेरपेनॉइड्सपैकी, eudesmol मध्ये 2.5 ppm पेक्षा कमी LC50 मूल्यासह सर्वात मोठी लार्व्हिसिडल आणि प्रौढ क्रिया असल्याचे आढळून आले, ज्यामुळे ते एडीस डासांच्या नियंत्रणासाठी एक आशादायक संयुग बनले.चेंग एट अल.४० च्या निष्कर्षांशी हे सुसंगत नसले तरी त्याची कामगिरी संपूर्ण EO Em पेक्षा चांगली आहे.युडेस्मॉल हे दोन आयसोप्रीन युनिट्स असलेले सेस्क्युटरपीन आहे जे निलगिरी सारख्या ऑक्सिजनयुक्त मोनोटर्पेनपेक्षा कमी अस्थिर आहे आणि त्यामुळे कीटकनाशक म्हणून जास्त क्षमता आहे.स्वतः युकॅलिप्टोलमध्ये लार्विसिडल क्रियाकलापांपेक्षा जास्त प्रौढ असतात आणि पूर्वीच्या अभ्यासाचे परिणाम या 37,43,44 चे समर्थन आणि खंडन करतात.एकट्याचा क्रियाकलाप संपूर्ण EO Cl च्या तुलनेत जवळपास आहे.आणखी एक सायकलिक मोनोटेरपीन, α-पिनेन, एडीस इजिप्तीवर लार्व्हिसाइडल प्रभावापेक्षा कमी प्रौढ प्रभाव आहे, जो पूर्ण EO Cl च्या परिणामाच्या विरुद्ध आहे.टेरपेनॉइड्सच्या एकूण कीटकनाशक क्रियाकलापांवर त्यांची लिपोफिलिसिटी, अस्थिरता, कार्बन शाखा, प्रक्षेपण क्षेत्र, पृष्ठभागाचे क्षेत्रफळ, कार्यात्मक गट आणि त्यांची स्थिती 45,46 यांचा प्रभाव पडतो.ही संयुगे पेशींचे संचय नष्ट करणे, श्वसनक्रिया अवरोधित करणे, मज्जातंतूंच्या आवेगांच्या प्रसारात व्यत्यय आणणे इत्यादी कार्य करू शकतात. ४७ सिंथेटिक ऑरगॅनोफॉस्फेट टेमेफॉसमध्ये LC50 मूल्य 0.43 पीपीएमसह सर्वात जास्त लार्व्हिसिडल क्रियाकलाप असल्याचे आढळले, जे लेकच्या डेटाशी सुसंगत आहे. उताळा48.कृत्रिम ऑरगॅनोफॉस्फरस मॅलेथिऑनची प्रौढ क्रिया 5.44 पीपीएमवर नोंदवली गेली.जरी या दोन ऑर्गेनोफॉस्फेट्सने एडिस इजिप्तीच्या प्रयोगशाळेतील स्ट्रेन विरूद्ध अनुकूल प्रतिसाद दर्शविला असला तरी, या संयुगांना डासांचा प्रतिकार जगाच्या विविध भागांमध्ये नोंदवला गेला आहे49.तथापि, हर्बल औषधांच्या प्रतिकारशक्तीच्या विकासाचे कोणतेही समान अहवाल आढळले नाहीत50.अशाप्रकारे, वेक्टर कंट्रोल प्रोग्राममध्ये वनस्पतिशास्त्र हे रासायनिक कीटकनाशकांचे संभाव्य पर्याय मानले जाते.
थायमेटफॉससह शक्तिशाली टेरपेनॉइड्स आणि टेरपेनॉइड्सपासून तयार केलेल्या 28 बायनरी संयोजनांवर (1:1) लार्व्हिसिडल प्रभावाची चाचणी घेण्यात आली आणि 9 संयोजने समन्वयवादी, 14 विरोधी आणि 5 विरोधी असल्याचे आढळले.परिणाम नाही.दुसरीकडे, प्रौढ सामर्थ्य जैवॲसेमध्ये, 7 संयोजने समन्वयवादी असल्याचे आढळून आले, 15 संयोग विरोधी होते आणि 6 संयोगांचा कोणताही परिणाम होत नसल्याची नोंद करण्यात आली.विशिष्ट संयोगांमुळे एक समन्वयात्मक परिणाम का निर्माण होतो याचे कारण उमेदवार संयुगे वेगवेगळ्या महत्त्वाच्या मार्गांमध्ये एकाच वेळी संवाद साधत असतात किंवा विशिष्ट जैविक मार्गाच्या विविध मुख्य एन्झाईम्सच्या अनुक्रमिक प्रतिबंधामुळे असू शकतात.डायलिल डायसल्फाइड, युकलिप्टस किंवा युजेनॉलसह लिमोनिनचे संयोजन लहान आणि मोठ्या दोन्ही प्रकारच्या अनुप्रयोगांमध्ये (तक्ता 6), तर निलगिरी किंवा α-पाइनेनसह त्याचे संयोजन अळ्यांवर विरोधी प्रभाव असल्याचे आढळले.सरासरी, लिमोनिन एक चांगला समन्वयक असल्याचे दिसून येते, शक्यतो मिथाइल गटांच्या उपस्थितीमुळे, स्ट्रॅटम कॉर्नियममध्ये चांगला प्रवेश आणि कृतीची वेगळी यंत्रणा 52,53.यापूर्वी असे नोंदवले गेले आहे की लिमोनेन कीटकांच्या क्युटिकल्समध्ये प्रवेश करून (संपर्क विषारीपणा), पचनसंस्थेवर (अँटीफिडेंट) प्रभाव टाकून किंवा श्वसन प्रणालीवर (फ्युमिगेशन ॲक्टिव्हिटी) परिणाम करून विषारी परिणाम घडवू शकते, 54 तर युजेनॉल सारख्या फेनिलप्रोपॅनॉइड्समुळे चयापचय एंझाइम्स 55 वर परिणाम होऊ शकतो. म्हणून, विविध क्रियांच्या यंत्रणेसह संयुगे एकत्रित केल्याने मिश्रणाचा एकूण प्राणघातक प्रभाव वाढू शकतो.युकॅलिप्टोल हे डायलिल डायसल्फाइड, युकॅलिप्टस किंवा α-पाइनिन यांच्याशी समन्वयवादी असल्याचे आढळले, परंतु इतर संयुगांसह इतर संयोजन एकतर गैर-लार्विसिडल किंवा विरोधी होते.सुरुवातीच्या अभ्यासातून असे दिसून आले आहे की युकॅलिप्टोलमध्ये एसिटाइलकोलीनेस्टेरेस (AChE), तसेच ऑक्टामाइन आणि GABA रिसेप्टर्सवर प्रतिबंधात्मक क्रिया आहे.चक्रीय मोनोटेरपीन्स, युकॅलिप्टोल, युजेनॉल, इत्यादिंची क्रिया करण्याची यंत्रणा त्यांच्या न्यूरोटॉक्सिक क्रियाकलापांसारखीच असू शकते, 57 त्यामुळे परस्पर प्रतिबंधाद्वारे त्यांचे एकत्रित परिणाम कमी केले जातात.त्याचप्रमाणे, डायलिल डायसल्फाइड, α-पाइनेन आणि लिमोनेनसह टेमेफॉसचे संयोजन हर्बल उत्पादने आणि सिंथेटिक ऑर्गनोफॉस्फेट्स 58 यांच्यातील समन्वयात्मक प्रभावाच्या पूर्वीच्या अहवालांना समर्थन देणारे, समन्वयवादी असल्याचे आढळले.
eudesmol आणि eucalyptol च्या संयोजनाचा एडिस इजिप्तीच्या लार्व्हा आणि प्रौढ अवस्थेवर एक समन्वयात्मक प्रभाव असल्याचे आढळून आले, शक्यतो त्यांच्या भिन्न रासायनिक रचनांमुळे त्यांच्या क्रियांच्या भिन्न पद्धतींमुळे.Eudesmol (एक सेस्क्युटरपीन) श्वसन प्रणालीवर परिणाम करू शकते 59 आणि युकॅलिप्टोल (एक मोनोटेरपीन) एसिटाइलकोलिनेस्टेरेस 60 वर परिणाम करू शकते.दोन किंवा अधिक लक्ष्य साइटवर घटकांचे सह-एक्सपोजर संयोजनाचा एकूण प्राणघातक प्रभाव वाढवू शकतो.प्रौढ पदार्थांच्या बायोअसेसमध्ये, मॅलेथिओन हे कार्व्होन किंवा युकॅलिप्टोल किंवा युकॅलिप्टोल किंवा डायलिल डायसल्फाइड किंवा α-पाइनेन यांच्याशी समन्वयवादी असल्याचे आढळून आले, जे लिमोनिन आणि डीच्या जोडणीसह सिनेर्जिस्टिक असल्याचे दर्शविते.ॲलील ट्रायसल्फाइडचा अपवाद वगळता टेरपीन संयुगेच्या संपूर्ण पोर्टफोलिओसाठी चांगले सिनर्जीस्टिक ऍलर्साइड उमेदवार.थंगम आणि कॅथिरेसन61 यांनी देखील हर्बल अर्कांसह मॅलेथिऑनच्या समन्वयात्मक प्रभावाचे समान परिणाम नोंदवले.कीटक डिटॉक्सिफायिंग एन्झाईम्सवर मॅलेथिऑन आणि फायटोकेमिकल्सच्या एकत्रित विषारी प्रभावामुळे हा समन्वयात्मक प्रतिसाद असू शकतो.ऑर्गनोफॉस्फेट्स जसे की मॅलेथिऑन सामान्यतः सायटोक्रोम P450 एस्टेरेसेस आणि मोनोऑक्सीजेनेसेस 62,63,64 प्रतिबंधित करून कार्य करतात.म्हणून, मॅलेथिऑनला क्रिया करण्याच्या या यंत्रणांसह आणि टेरपेन्सच्या क्रियांच्या वेगवेगळ्या यंत्रणेसह एकत्रित केल्याने डासांवर एकूण प्राणघातक प्रभाव वाढू शकतो.
दुसरीकडे, विरोध दर्शविते की निवडलेल्या संयुगे एकट्या प्रत्येक संयुगाच्या तुलनेत कमी सक्रिय असतात.काही संयोगांमध्ये विरोधाचे कारण असे असू शकते की एक कंपाऊंड शोषण, वितरण, चयापचय किंवा उत्सर्जन दर बदलून दुस-या कंपाऊंडचे वर्तन सुधारते.सुरुवातीच्या संशोधकांनी हे औषधांच्या संयोजनातील विरोधाचे कारण मानले.रेणू संभाव्य यंत्रणा 65. त्याचप्रमाणे, विरोधाची संभाव्य कारणे समान ग्रहणकर्त्यासाठी किंवा लक्ष्य साइटसाठी घटक संयुगांची समान क्रिया, स्पर्धा यांच्याशी संबंधित असू शकतात.काही प्रकरणांमध्ये, लक्ष्य प्रोटीनचे गैर-स्पर्धात्मक प्रतिबंध देखील होऊ शकतात.या अभ्यासात, दोन ऑर्गेनोसल्फर संयुगे, डायलिल डायसल्फाइड आणि डायलिल ट्रायसल्फाइड, विरोधी प्रभाव दर्शवितात, शक्यतो समान लक्ष्य साइटसाठी स्पर्धेमुळे.त्याचप्रमाणे, या दोन सल्फर यौगिकांनी विरोधी प्रभाव दर्शविला आणि युडेस्मॉल आणि α-पाइनेनसह एकत्रित केल्यावर कोणताही परिणाम झाला नाही.युडेस्मॉल आणि अल्फा-पाइनेन हे चक्रीय स्वरूपाचे आहेत, तर डायलिल डायसल्फाइड आणि डायलिल ट्रायसल्फाइड निसर्गात ॲलिफॅटिक आहेत.रासायनिक संरचनेच्या आधारे, या संयुगांच्या संयोगाने एकूण प्राणघातक क्रिया वाढवायला हवी कारण त्यांची लक्ष्य स्थळे सहसा भिन्न असतात 34,47, परंतु प्रायोगिकपणे आम्हाला विरोध आढळला, जो विवोमधील काही अज्ञात जीवांमध्ये या संयुगांच्या भूमिकेमुळे असू शकतो.परस्परसंवादाचा परिणाम म्हणून प्रणाली.त्याचप्रमाणे, cineole आणि α-pinene च्या संयोगाने विरोधी प्रतिक्रिया निर्माण केल्या, जरी संशोधकांनी पूर्वी अहवाल दिला की दोन संयुगे 47,60 कृतीचे वेगवेगळे लक्ष्य आहेत.दोन्ही संयुगे चक्रीय मोनोटेरपीन्स असल्याने, काही सामान्य लक्ष्य साइट्स असू शकतात जी बंधनकारक करण्यासाठी स्पर्धा करू शकतात आणि अभ्यास केलेल्या संयुक्त जोड्यांच्या एकूण विषारीपणावर प्रभाव टाकू शकतात.
LC50 मूल्ये आणि निरीक्षण केलेल्या मृत्यूच्या आधारावर, दोन सर्वोत्तम सिनर्जिस्टिक टेरपीन संयोजन निवडले गेले, ते म्हणजे कार्व्होन + लिमोनेन आणि युकॅलिप्टोल + युडेस्मॉलच्या जोड्या, तसेच टेरपीनसह कृत्रिम ऑर्गनोफॉस्फरस मॅलेथिओन.मॅलेथिऑन + युडेस्मॉल यौगिकांच्या इष्टतम सहक्रियात्मक संयोजनाची प्रौढ कीटकनाशक बायोसेमध्ये चाचणी केली गेली.हे प्रभावी संयोजन तुलनेने मोठ्या एक्सपोजर स्पेसवर मोठ्या संख्येने व्यक्तींविरूद्ध कार्य करू शकतात किंवा नाही याची पुष्टी करण्यासाठी मोठ्या कीटक वसाहतींना लक्ष्य करा.हे सर्व संयोजन कीटकांच्या मोठ्या थवांविरूद्ध एक समन्वयात्मक प्रभाव दर्शवतात.एडीस इजिप्ती अळ्यांच्या मोठ्या लोकसंख्येविरुद्ध चाचणी केलेल्या इष्टतम सिनर्जिस्टिक लार्व्हिसिडल संयोजनासाठी समान परिणाम प्राप्त झाले.अशाप्रकारे, असे म्हणता येईल की वनस्पती EO संयुगांचे प्रभावी सिनर्जिस्टिक लार्व्हिसिडल आणि ॲडल्टिसाइडल संयोजन विद्यमान कृत्रिम रसायनांविरूद्ध एक मजबूत उमेदवार आहे आणि एडीस इजिप्ती लोकसंख्येवर नियंत्रण ठेवण्यासाठी त्याचा वापर केला जाऊ शकतो.त्याचप्रमाणे, डासांना दिल्या जाणाऱ्या थायमेटफॉस किंवा मॅलेथिऑनचे डोस कमी करण्यासाठी सिंथेटिक लार्व्हिसाइड्स किंवा ॲडल्टिसाईड्सचे टेरपीनसह प्रभावी संयोजन देखील वापरले जाऊ शकते.एडिस डासांमधील औषधांच्या प्रतिकारशक्तीच्या उत्क्रांतीवरील भविष्यातील अभ्यासासाठी हे शक्तिशाली सहक्रियात्मक संयोजन उपाय प्रदान करू शकतात.
एडिस इजिप्तीची अंडी प्रादेशिक वैद्यकीय संशोधन केंद्र, दिब्रुगड, भारतीय वैद्यकीय संशोधन परिषदेकडून गोळा केली गेली आणि नियंत्रित तापमान (28 ± 1 ° से) आणि आर्द्रता (85 ± 5%) प्राणीशास्त्र विभाग, गुवाहाटी विद्यापीठात ठेवण्यात आली. खालील अटी: अरिवोलीचे वर्णन केले गेले आणि इतर.अंड्यातून बाहेर पडल्यानंतर, अळ्यांना लार्व्हा फूड (कुत्र्याला बिस्किट पावडर आणि यीस्ट 3:1 च्या प्रमाणात) आणि प्रौढांना 10% ग्लुकोजचे द्रावण दिले गेले.उदयानंतर 3 व्या दिवसापासून, प्रौढ मादी डासांना अल्बिनो उंदरांचे रक्त शोषण्याची परवानगी होती.एका ग्लासमध्ये फिल्टर पेपर पाण्यात भिजवा आणि अंडी देणाऱ्या पिंजऱ्यात ठेवा.
नीलगिरीची पाने (Myrtaceae), पवित्र तुळस (Lamiaceae), पुदीना (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) आणि allium bulbs (Amaryllidaceae) या निवडक वनस्पतींचे नमुने.गुवाहाटी येथून गोळा केलेले आणि गुवाहाटी विद्यापीठाच्या वनस्पतिशास्त्र विभागाद्वारे ओळखले जाते.गोळा केलेले वनस्पतींचे नमुने (500 ग्रॅम) 6 तासांसाठी क्लीव्हेंजर उपकरण वापरून हायड्रोडिस्टिलेशनच्या अधीन होते.काढलेले EO स्वच्छ काचेच्या कुपींमध्ये गोळा केले गेले आणि पुढील अभ्यासासाठी 4°C वर साठवले गेले.
किंचित सुधारित मानक जागतिक आरोग्य संघटनेच्या कार्यपद्धती 67 वापरून लार्विसिडल विषाक्ततेचा अभ्यास केला गेला.इमल्सीफायर म्हणून DMSO वापरा.प्रत्येक EO एकाग्रतेची सुरुवातीला 100 आणि 1000 ppm वर चाचणी करण्यात आली, प्रत्येक प्रतिकृतीमध्ये 20 अळ्या उघडकीस आल्या.परिणामांवर आधारित, एकाग्रता श्रेणी लागू केली गेली आणि 1 तास ते 6 तास (1 तासांच्या अंतराने) आणि उपचारानंतर 24 तास, 48 तास आणि 72 तासांनी मृत्यूची नोंद केली गेली.24, 48 आणि 72 तासांच्या एक्सपोजरनंतर सबलेथल सांद्रता (LC50) निर्धारित केली गेली.प्रत्येक एकाग्रता एका नकारात्मक नियंत्रणासह (केवळ पाणी) आणि एक सकारात्मक नियंत्रण (DMSO-उपचार केलेले पाणी) सह तिप्पट स्वरूपात तपासले गेले.प्युपेशन झाल्यास आणि नियंत्रण गटातील 10% पेक्षा जास्त अळ्या मरत असल्यास, प्रयोग पुन्हा केला जातो.नियंत्रण गटातील मृत्यू दर 5-10% च्या दरम्यान असल्यास, ॲबॉट सुधारणा सूत्र 68 वापरा.
रामर इत्यादींनी वर्णन केलेली पद्धत.69 एडिस इजिप्ती विरूद्ध प्रौढ बायोॲसेसाठी एसीटोनचा वापर सॉल्व्हेंट म्हणून केला गेला.प्रत्येक EO ची सुरुवातीस प्रौढ एडीस इजिप्ती डासांवर 100 आणि 1000 ppm च्या एकाग्रतेवर चाचणी करण्यात आली.प्रत्येक तयार केलेल्या द्रावणाच्या 2 मिली व्हॉटमन नंबरवर लावा.फिल्टर पेपरचा 1 तुकडा (आकार 12 x 15 सेमी 2) आणि एसीटोनला 10 मिनिटे बाष्पीभवन होऊ द्या.केवळ 2 मिली एसीटोनने उपचार केलेला फिल्टर पेपर नियंत्रण म्हणून वापरला गेला.एसीटोनचे बाष्पीभवन झाल्यानंतर, उपचारित फिल्टर पेपर आणि कंट्रोल फिल्टर पेपर दंडगोलाकार नळी (10 सेमी खोल) मध्ये ठेवले जातात.दहा 3- ते 4-दिवस जुने रक्त न खाणारे डास प्रत्येक एकाग्रतेच्या तिप्पटांमध्ये हस्तांतरित केले गेले.प्राथमिक चाचण्यांच्या परिणामांवर आधारित, निवडलेल्या तेलांच्या विविध एकाग्रतेची चाचणी घेण्यात आली.डास सोडल्यानंतर 1 तास, 2 तास, 3 तास, 4 तास, 5 तास, 6 तास, 24 तास, 48 तास आणि 72 तासांनी मृत्यूची नोंद झाली.24 तास, 48 तास आणि 72 तासांच्या एक्सपोजर वेळेसाठी LC50 मूल्यांची गणना करा.नियंत्रण लॉटचा मृत्यू दर 20% पेक्षा जास्त असल्यास, संपूर्ण चाचणी पुन्हा करा.त्याचप्रमाणे, नियंत्रण गटातील मृत्यू दर 5% पेक्षा जास्त असल्यास, ॲबॉटचे सूत्र 68 वापरून उपचार केलेल्या नमुन्यांचे परिणाम समायोजित करा.
निवडलेल्या आवश्यक तेलांच्या घटक संयुगांचे विश्लेषण करण्यासाठी गॅस क्रोमॅटोग्राफी (Agilent 7890A) आणि मास स्पेक्ट्रोमेट्री (Accu TOF GCv, Jeol) केली गेली.GC FID डिटेक्टर आणि केशिका स्तंभ (HP5-MS) ने सुसज्ज होता.वाहक वायू हेलियम होता, प्रवाह दर 1 मिली/मिनिट होता.GC प्रोग्राम Allium sativum 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M आणि Ocimum Sainttum 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280 वर सेट करतो, मिंटसाठी 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, निलगिरीसाठी 20.60-1M-10-200-3M-30-280, आणि लाल साठी हजार थरांसाठी ते आहेत 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M.
प्रत्येक EO चे प्रमुख संयुगे GC क्रोमॅटोग्राम आणि मास स्पेक्ट्रोमेट्री परिणाम (NIST 70 मानक डेटाबेसचा संदर्भ) वरून मोजलेल्या क्षेत्राच्या टक्केवारीच्या आधारावर ओळखले गेले.
प्रत्येक EO मधील दोन प्रमुख संयुगे GC-MS परिणामांवर आधारित निवडले गेले आणि पुढील बायोअसेसाठी 98-99% शुद्धतेवर Sigma-Aldrich कडून खरेदी केले गेले.वर वर्णन केल्याप्रमाणे एडिस इजिप्ती विरुद्ध अळीनाशक आणि प्रौढांच्या परिणामकारकतेसाठी संयुगे तपासण्यात आली.सर्वात सामान्यपणे वापरल्या जाणाऱ्या सिंथेटिक लार्व्हिसाइड्स टेमेफोसेट (सिग्मा अल्ड्रिच) आणि प्रौढ औषध मॅलेथिऑन (सिग्मा अल्ड्रिच) यांचे विश्लेषण निवडलेल्या EO संयुगांसह त्यांच्या परिणामकारकतेची तुलना करण्यासाठी, समान प्रक्रियेचे अनुसरण करून करण्यात आले.
निवडलेल्या टेरपीन संयुगे आणि टेरपीन संयुगे अधिक व्यावसायिक ऑर्गनोफॉस्फेट्स (टाइलफॉस आणि मॅलाथिऑन) यांचे बायनरी मिश्रण 1:1 गुणोत्तरामध्ये प्रत्येक उमेदवार संयुगेच्या LC50 डोसचे मिश्रण करून तयार केले गेले.वर वर्णन केल्याप्रमाणे एडिस इजिप्तीच्या लार्व्हा आणि प्रौढ अवस्थेवर तयार संयोजनांची चाचणी घेण्यात आली.प्रत्येक बायोअसे प्रत्येक संयोजनासाठी तिप्पट आणि प्रत्येक संयोजनात उपस्थित असलेल्या वैयक्तिक संयुगेसाठी त्रिगुणांमध्ये केले गेले.24 तासांनंतर लक्ष्यित कीटकांच्या मृत्यूची नोंद झाली.खालील सूत्र वापरून बायनरी मिश्रणासाठी अपेक्षित मृत्यु दर मोजा.
जेथे E = बायनरी संयोजनाच्या प्रतिसादात एडीस इजिप्ती डासांचा अपेक्षित मृत्यू दर, म्हणजे कनेक्शन (A + B).
Pavla52 द्वारे वर्णन केलेल्या पद्धतीद्वारे गणना केलेल्या χ2 मूल्यावर आधारित प्रत्येक बायनरी मिश्रणाच्या प्रभावाला synergistic, antagonistic, किंवा no effect असे लेबल केले गेले.खालील सूत्र वापरून प्रत्येक संयोजनासाठी χ2 मूल्य मोजा.
जेव्हा गणना केलेले χ2 मूल्य संबंधित स्वातंत्र्याच्या (95% आत्मविश्वास अंतराल) साठी सारणी मूल्यापेक्षा मोठे होते आणि निरीक्षण मृत्युदर अपेक्षित मृत्युदरापेक्षा जास्त असल्याचे आढळल्यास संयोजनाचा परिणाम समन्वयात्मक म्हणून परिभाषित केला जातो.त्याचप्रमाणे, जर कोणत्याही संयोजनासाठी गणना केलेले χ2 मूल्य काही अंशांच्या स्वातंत्र्यासह सारणी मूल्यापेक्षा जास्त असेल, परंतु निरीक्षण मृत्युदर अपेक्षित मृत्युदरापेक्षा कमी असेल, तर उपचार विरोधी मानले जाते.आणि जर कोणत्याही संयोगात χ2 चे गणना केलेले मूल्य संबंधित स्वातंत्र्य अंशांमधील सारणी मूल्यापेक्षा कमी असेल, तर संयोजनाचा कोणताही परिणाम होणार नाही असे मानले जाते.
मोठ्या संख्येने कीटकांच्या विरूद्ध चाचणीसाठी तीन ते चार संभाव्य सहक्रियात्मक संयोजन (100 अळ्या आणि 50 अळ्या आणि प्रौढ कीटक क्रियाकलाप) निवडले गेले.प्रौढ) वरीलप्रमाणे पुढे जा.मिश्रणासह, निवडलेल्या मिश्रणामध्ये उपस्थित असलेल्या वैयक्तिक संयुगे देखील एडिस इजिप्ती अळ्या आणि प्रौढांच्या समान संख्येवर तपासल्या गेल्या.संयोजन गुणोत्तर हे एका उमेदवाराच्या संयुगाचा एक भाग LC50 डोस आणि इतर घटक संयुगाचा भाग LC50 डोस आहे.प्रौढ क्रियाकलाप बायोअसेमध्ये, निवडक संयुगे सॉल्व्हेंट एसीटोनमध्ये विरघळली गेली आणि 1300 सेमी 3 दंडगोलाकार प्लास्टिक कंटेनरमध्ये गुंडाळलेल्या फिल्टर पेपरवर लागू केली गेली.एसीटोन 10 मिनिटांसाठी बाष्पीभवन झाले आणि प्रौढांना सोडण्यात आले.त्याचप्रमाणे, लार्व्हिसाइडल बायोॲसेमध्ये, LC50 उमेदवार संयुगेचे डोस प्रथम DMSO च्या समान प्रमाणात विरघळले गेले आणि नंतर 1300 cc प्लास्टिकच्या कंटेनरमध्ये साठवलेल्या 1 लिटर पाण्यात मिसळले गेले आणि अळ्या सोडल्या गेल्या.
LC50 मूल्यांची गणना करण्यासाठी SPSS (आवृत्ती 16) आणि Minitab सॉफ्टवेअर वापरून 71 रेकॉर्ड केलेल्या मृत्यू डेटाचे संभाव्य विश्लेषण केले गेले.