बेनिनमध्ये १२, २४ आणि ३६ महिन्यांच्या घरगुती वापरानंतर पायरेथ्रॉइड-प्रतिरोधक मलेरिया वाहकांविरुद्ध नवीन पिढीच्या कीटकनाशक-प्रक्रिया केलेल्या जाळ्यांची प्रायोगिक परिणामकारकता | मलेरिया जर्नल

पायरेथ्रिन-प्रतिरोधक मलेरिया वाहकांविरुद्ध नवीन आणि क्षेत्रीय चाचणी केलेल्या पुढच्या पिढीच्या मच्छरदाण्यांच्या जैविक परिणामकारकतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी, दक्षिण बेनिनमधील खोवे येथे झोपड्यांवर आधारित प्रायोगिक चाचण्यांची मालिका आयोजित करण्यात आली होती. क्षेत्रीय चाचणीत वापरलेल्या जुन्या मच्छरदाण्या १२, २४ आणि ३६ महिन्यांनंतर घराघरातून काढण्यात आल्या. संपूर्ण कीटकनाशक-उपचारित मच्छरदाण्यांमधून कापलेल्या जाळीच्या तुकड्यांचे रासायनिक रचनेसाठी विश्लेषण करण्यात आले आणि खोवे येथील वाहक कीटकांच्या लोकसंख्येतील कीटकनाशक प्रतिकारशक्तीतील बदलांचे मूल्यांकन करण्यासाठी प्रत्येक चाचणीदरम्यान संवेदनशीलता जैवचाचण्या घेण्यात आल्या.
इंटरसेप्टर® G2 ने इतर आयटीएन (ITNs) पेक्षा चांगली कामगिरी केली, ज्यामुळे पायरेथ्रॉइड आणि क्लोरफेनापायर जाळ्यांची इतर प्रकारच्या जाळ्यांपेक्षा श्रेष्ठता सिद्ध झाली. नवीन उत्पादनांपैकी, पुढच्या पिढीतील सर्व आयटीएनने इंटरसेप्टर® पेक्षा चांगली जैवकार्यक्षमता दर्शविली; तथापि, नॉन-पायरेथ्रॉइड संयुगांच्या कमी टिकाऊपणामुळे, क्षेत्रीय वापरानंतर या सुधारणेचे प्रमाण कमी झाले. हे परिणाम पुढच्या पिढीतील आयटीएनच्या कीटकनाशक टिकून राहण्याच्या क्षमतेत सुधारणा करण्याची गरज अधोरेखित करतात.
     कीटकनाशककीटकनाशक-प्रक्रिया केलेल्या मच्छरदाण्यांनी (ITNs) गेल्या २० वर्षांत मलेरियामुळे होणारे आजारपण आणि मृत्यू कमी करण्यात महत्त्वपूर्ण भूमिका बजावली आहे. २००४ पासून, जगभरात ३ अब्जाहून अधिक ITNs वितरित करण्यात आल्या आहेत, आणि मॉडेलिंग अभ्यासांनुसार २००० ते २०१५ दरम्यान उप-सहारा आफ्रिकेतील ६८% मलेरियाची प्रकरणे टाळण्यात आली. दुर्दैवाने, पायरेथ्रॉइड्स (ITNs मध्ये वापरल्या जाणाऱ्या कीटकनाशकांचा एक मानक प्रकार) विरुद्ध मलेरिया वाहक डासांच्या प्रजातींमध्ये प्रतिकारशक्ती लक्षणीयरीत्या वाढली आहे, ज्यामुळे या आवश्यक उपायाच्या परिणामकारकतेला धोका निर्माण झाला आहे. त्याच वेळी, जागतिक स्तरावर मलेरिया नियंत्रणातील प्रगती मंदावली आहे, आणि २०१५ पासून अनेक उच्च-भार असलेल्या देशांमध्ये मलेरियाच्या प्रकरणांमध्ये वाढ झाली आहे. या प्रवृत्तींमुळे पायरेथ्रॉइड प्रतिकारशक्तीच्या धोक्याला तोंड देण्यासाठी आणि हा भार कमी करण्यास व महत्त्वाकांक्षी जागतिक उद्दिष्टे साध्य करण्यास मदत करण्याच्या उद्देशाने नाविन्यपूर्ण ITN उत्पादनांच्या नवीन पिढीच्या विकासाला चालना मिळाली आहे.
सध्या बाजारात तीन नवीन पिढीच्या कीटकनाशक-उपचारित मच्छरदाण्या (ITNs) उपलब्ध आहेत, ज्या प्रत्येकामध्ये पायरेथ्रॉइडसोबत दुसरे कीटकनाशक किंवा सहक्रियाकारक (synergist) यांचे मिश्रण असते, जे मलेरिया वाहकांमधील पायरेथ्रॉइड प्रतिकारशक्तीवर मात करण्यास सक्षम आहे. अलिकडच्या वर्षांत, केवळ पायरेथ्रॉइड असलेल्या प्रमाणित मच्छरदाण्यांच्या तुलनेत या मच्छरदाण्यांच्या साथीच्या रोगांसंबंधीच्या परिणामकारकतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी आणि जागतिक आरोग्य संघटनेच्या (WHO) शिफारशींना पाठिंबा देण्यासाठी आवश्यक पुरावे प्रदान करण्याकरिता अनेक समूह यादृच्छिक नियंत्रित चाचण्या (RCTs) घेण्यात आल्या आहेत. टांझानिया आणि युगांडा येथील समूह यादृच्छिक नियंत्रित चाचण्यांमध्ये दोन उत्पादनांनी (Olyset® Plus आणि PermaNet® 3.0) केवळ पायरेथ्रॉइड असलेल्या मच्छरदाण्यांच्या तुलनेत उत्कृष्ट साथीच्या रोगांसंबंधीचा परिणाम दाखवल्यानंतर, पायरेथ्रॉइडसोबत पायपेरोनिल ब्युटॉक्साइड (PBO) यांचे मिश्रण असलेल्या मच्छरदाण्यांची जागतिक आरोग्य संघटनेने (WHO) सर्वप्रथम शिफारस केली. पायरेथ्रॉइड हे एक सहक्रियाकारक आहे जे डासांच्या विषहरण करणाऱ्या एन्झाइम्सना रोखून पायरेथ्रॉइडची परिणामकारकता वाढवते. तथापि, पश्चिम आफ्रिकेत पायरेथ्रॉइड-पीबीओ मच्छरदाण्यांचे सार्वजनिक आरोग्य मूल्य निश्चित करण्यासाठी अधिक माहितीची आवश्यकता आहे, कारण तेथे तीव्र पायरेथ्रॉइड प्रतिरोधामुळे केवळ पायरेथ्रॉइड असलेल्या मच्छरदाण्यांच्या तुलनेत त्यांचे फायदे कमी होऊ शकतात.
कीटकनाशक-उपचारित मच्छरदाण्यांमधील (ITNs) कीटकनाशकांचा टिकाव सामान्यतः समुदायांमधून ठराविक कालावधीने मच्छरदाण्या गोळा करून आणि कीटकांवर पैदा केलेल्या डासांच्या प्रजाती वापरून प्रयोगशाळेतील जैवचाचण्यांमध्ये त्यांची तपासणी करून तपासला जातो. या चाचण्या कालांतराने मच्छरदाण्यांच्या पृष्ठभागावरील कीटकनाशकांची जैवउपलब्धता आणि परिणामकारकता यांचे वैशिष्ट्य ठरवण्यासाठी उपयुक्त असल्या तरी, त्या विविध प्रकारच्या पुढच्या पिढीच्या मच्छरदाण्यांच्या तुलनात्मक परिणामकारकतेबद्दल मर्यादित माहिती देतात, कारण वापरल्या जाणाऱ्या पद्धती आणि डासांच्या प्रजाती त्यांमध्ये असलेल्या कीटकनाशकांच्या कार्यपद्धतीनुसार जुळवून घ्याव्या लागतात. प्रायोगिक झोपडी चाचणी हा एक पर्यायी दृष्टिकोन आहे, जो वापरादरम्यान जंगली डास आणि घरगुती मच्छरदाण्यांमधील नैसर्गिक आंतरक्रियांचे अनुकरण करणाऱ्या परिस्थितीत टिकाऊपणाच्या अभ्यासात कीटकनाशक-उपचारित मच्छरदाण्यांच्या परिणामकारकतेचे तुलनात्मक मूल्यांकन करण्यासाठी वापरला जाऊ शकतो. खरं तर, साथीच्या रोगांच्या माहितीसाठी कीटकशास्त्रीय पर्यायांचा वापर करून केलेल्या अलीकडील मॉडेलिंग अभ्यासांनी दाखवले आहे की, या चाचण्यांमध्ये मोजलेले डासांचे मृत्यूदर आणि खाद्यग्रहण दर यांचा उपयोग क्लस्टर RCTs मध्ये मलेरियाच्या घटना आणि प्रसारावर कीटकनाशक-उपचारित मच्छरदाण्यांच्या परिणामाचा अंदाज लावण्यासाठी केला जाऊ शकतो. अशाप्रकारे, झोपडी-आधारित प्रायोगिक चाचण्या, ज्यामध्ये क्षेत्रातून गोळा केलेल्या कीटकनाशक-उपचारित लिम्फ नोड्सचा क्लस्टर आरसीटीमध्ये समावेश केला जातो, त्या कीटकनाशक-उपचारित लिम्फ नोड्सच्या अपेक्षित जीवनकाळात त्यांच्या तुलनात्मक जैवकार्यक्षमतेवर आणि कीटकनाशक टिकून राहण्याच्या क्षमतेवर मौल्यवान माहिती देऊ शकतात आणि या अभ्यासांच्या साथरोगशास्त्रीय परिणामांचा अर्थ लावण्यास मदत करू शकतात.
प्रायोगिक झोपडी चाचणी ही जागतिक आरोग्य संघटनेने कीटकनाशक-प्रक्रिया केलेल्या मच्छरदाण्यांच्या परिणामकारकतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी शिफारस केलेली एक प्रमाणित, मानवी वस्तीचे अनुकरण करणारी चाचणी आहे. या चाचण्या, डासांना घरातील मच्छरदाण्यांशी संपर्क आल्यावर ज्या वास्तविक परिस्थितीचा सामना करावा लागतो, त्याचेच अनुकरण करतात आणि म्हणूनच, वापरलेल्या मच्छरदाण्यांच्या अपेक्षित सेवाकाळातील जैविक परिणामकारकतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी ही एक अत्यंत योग्य पद्धत आहे.
या अभ्यासात प्रायोगिक गोठ्यांमध्ये प्रत्यक्ष मैदानी परिस्थितीत तीन वेगवेगळ्या प्रकारच्या नवीन पिढीच्या कीटकनाशक मच्छरदाण्यांची (पर्मानेट® ३.०, रॉयल गार्ड® आणि इंटरसेप्टर® जी२) कीटकशास्त्रीय कार्यक्षमता तपासण्यात आली आणि त्यांची तुलना एका प्रमाणित, केवळ पायरेथ्रिन असलेल्या मच्छरदाणीशी (इंटरसेप्टर®) करण्यात आली. या सर्व कीटकनाशक-प्रक्रिया केलेल्या मच्छरदाण्यांचा समावेश रोगवाहक नियंत्रणासाठीच्या जागतिक आरोग्य संघटनेच्या (WHO) पूर्व-पात्रता यादीत आहे. प्रत्येक मच्छरदाणीची सविस्तर वैशिष्ट्ये खाली दिली आहेत:
मार्च २०२० मध्ये, दक्षिण बेनिनमधील झोऊ प्रांतातील झोपड्यांच्या गावांमध्ये, झोपड्यांमधील प्रायोगिक चाचण्यांसाठी, क्षेत्रीय वापरासाठी जुन्या झालेल्या मच्छरदाण्यांची एक मोठ्या प्रमाणावर वितरण मोहीम राबवण्यात आली. दुहेरी कीटकनाशक-उपचारित मच्छरदाण्यांच्या साथीच्या रोगांसंबंधीच्या परिणामकारकतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी, क्लस्टर आरसीटी (RCT) मध्ये समाविष्ट असलेल्या टिकाऊपणाच्या निरीक्षणात्मक अभ्यासाचा भाग म्हणून, कोवे, झाग्नानाडो आणि ओइन्ही या नगरपालिकांमधील यादृच्छिकपणे निवडलेल्या क्लस्टर्समधून इंटरसेप्टर®, रॉयल गार्ड® आणि इंटरसेप्टर® जी२ या मच्छरदाण्या निवडण्यात आल्या. जिजा आणि बोहिकॉन टाउनशिपजवळील अवोकान्झुन गावातून (७°२०′ उत्तर, १°५६′ पूर्व) पर्मानेट® ३.० मच्छरदाण्या गोळा करण्यात आल्या आणि राष्ट्रीय मलेरिया नियंत्रण कार्यक्रमाच्या २०२० च्या व्यापक मोहिमेदरम्यान आरसीटी क्लस्टर मच्छरदाण्यांसोबत एकाच वेळी वितरित करण्यात आल्या. आकृती १ मध्ये प्रायोगिक झोपड्यांच्या ठिकाणांच्या तुलनेत, विविध आयटीएन (ITN) प्रकार गोळा केलेल्या अभ्यास क्लस्टर्स/गावांची स्थाने दर्शविली आहेत.
प्रसारानंतर १२, २४ आणि ३६ महिन्यांनी घरांतून काढल्यावर इंटरसेप्टर®, पर्मानेट® ३.०, रॉयल गार्ड® आणि इंटरसेप्टर® जी२ या कीटकनाशक-उपचारित जाळ्यांच्या (ITNs) कीटकशास्त्रीय कामगिरीची तुलना करण्यासाठी एक प्रायोगिक झोपडी चाचणी घेण्यात आली. प्रत्येक वार्षिक टप्प्यावर, शेतातील जुन्या ITNs च्या कामगिरीची तुलना प्रत्येक प्रकारच्या नवीन, न वापरलेल्या जाळ्यांशी आणि नकारात्मक नियंत्रण म्हणून उपचार न केलेल्या जाळ्यांशी करण्यात आली. प्रत्येक वार्षिक टप्प्यावर, शेतातील जुन्या ITNs चे एकूण ५४ प्रतिकृती नमुने आणि प्रत्येक प्रकारच्या ६ नवीन ITNs यांची १ किंवा २ प्रतिकृती झोपडी चाचण्यांमध्ये, उपचारांच्या दैनंदिन रोटेशनसह चाचणी घेण्यात आली. प्रत्येक झोपडी चाचणीपूर्वी, जागतिक आरोग्य संघटनेच्या (WHO) शिफारशींनुसार प्रत्येक प्रकारच्या ITN च्या जुन्या शेतातील जाळ्यांचा सरासरी सच्छिद्रता निर्देशांक मोजण्यात आला. दैनंदिन वापरामुळे होणारी झीज दर्शवण्यासाठी, जागतिक आरोग्य संघटनेच्या शिफारशींनुसार, सर्व नवीन ITNs आणि उपचार न केलेल्या नियंत्रण जाळ्यांना सहा ४ x ४ सेमी आकाराची छिद्रे पाडण्यात आली: प्रत्येक लांब बाजूच्या पॅनेलमध्ये दोन आणि प्रत्येक लहान बाजूच्या पॅनेलमध्ये एक. झोपडीच्या भिंतींच्या वरच्या कोपऱ्यांतील खिळ्यांना छताच्या पत्र्यांच्या कडा दोऱ्यांनी बांधून झोपडीच्या आत मच्छरदाणी बसवण्यात आली. प्रत्येक झोपडीच्या चाचणीमध्ये खालील उपचारांचे मूल्यांकन करण्यात आले:
ज्या वर्षी जाळ्या काढण्यात आल्या, त्याच वर्षी प्रायोगिक झोपड्यांमध्ये जुन्या झालेल्या जाळ्यांचे मूल्यांकन करण्यात आले. झोपडीतील चाचण्या त्याच ठिकाणी मे ते सप्टेंबर २०२१, एप्रिल ते जून २०२२ आणि मे ते जुलै २०२३ या काळात घेण्यात आल्या, ज्यात अनुक्रमे १२, २४ आणि ३६ महिन्यांनंतर जाळ्या काढण्यात आल्या. प्रत्येक चाचणी एका संपूर्ण उपचार चक्रासाठी (९ आठवड्यांत ५४ रात्री) चालली, फक्त १२ महिन्यांचा अपवाद वगळता, जेव्हा डासांच्या नमुन्याचा आकार वाढवण्यासाठी दोन सलग उपचार चक्रे घेण्यात आली. लॅटिन स्क्वेअर डिझाइननुसार, झोपडीच्या स्थानाच्या परिणामांवर नियंत्रण ठेवण्यासाठी प्रायोगिक झोपड्यांमध्ये उपचारांची साप्ताहिक अदलाबदल केली गेली, तर वैयक्तिक यजमानांच्या डासांच्या आकर्षणातील फरकांवर नियंत्रण ठेवण्यासाठी स्वयंसेवकांची दररोज अदलाबदल केली गेली. आठवड्यातून ६ दिवस डास गोळा केले गेले; ७ व्या दिवशी, पुढील रोटेशन चक्रापूर्वी, प्रादुर्भाव टाळण्यासाठी झोपड्या स्वच्छ करून हवेशीर केल्या गेल्या.
पायरेथ्रॉइड-प्रतिरोधक ॲनोफिलीस गॅम्बिया डासांविरुद्ध प्रायोगिक झोपडी उपचाराचे प्राथमिक परिणाम आणि पुढील पिढीच्या आयटीएनची (ITN) केवळ पायरेथ्रॉइड असलेल्या इंटरसेप्टर® नेटशी केलेली तुलना खालीलप्रमाणे होती:
पायरेथ्रॉइड-प्रतिरोधक ॲनोफिलीस गॅम्बिया डासांविरुद्धच्या प्रायोगिक झोपडी उपचाराचे दुय्यम परिणाम खालीलप्रमाणे होते:
नियंत्रण (%) – उपचार न केलेल्या गटाच्या तुलनेत उपचार केलेल्या गटामध्ये प्रवेश दरात झालेली घट. याची गणना खालीलप्रमाणे आहे:
येथे Tu म्हणजे उपचार न केलेल्या नियंत्रण गटामध्ये समाविष्ट असलेल्या डासांची संख्या आहे आणि Tt म्हणजे उपचार केलेल्या गटामध्ये समाविष्ट असलेल्या डासांची संख्या आहे.
टर्न रेट (%) – उपचारांमुळे होणाऱ्या संभाव्य त्रासामुळे होणारा टर्न रेट, जो बाल्कनीवर गोळा केलेल्या डासांच्या प्रमाणाच्या स्वरूपात व्यक्त केला जातो.
रक्तशोषण दमन गुणांक (%) म्हणजे उपचार न केलेल्या नियंत्रण गटाच्या तुलनेत उपचारित गटातील रक्तशोषक डासांच्या प्रमाणात झालेली घट. गणना करण्याची पद्धत खालीलप्रमाणे आहे: जिथे Bfu हे उपचार न केलेल्या नियंत्रण गटातील रक्तशोषक डासांचे प्रमाण आहे, आणि Bft हे उपचारित गटातील रक्तशोषक डासांचे प्रमाण आहे.
प्रजननक्षमतेतील घट (%) — उपचार न केलेल्या नियंत्रण गटाच्या तुलनेत, उपचार केलेल्या गटातील प्रजननक्षम डासांच्या प्रमाणात झालेली घट. गणना करण्याची पद्धत खालीलप्रमाणे आहे: जिथे Fu हे उपचार न केलेल्या नियंत्रण गटातील प्रजननक्षम डासांचे प्रमाण आहे, आणि Ft हे उपचार केलेल्या गटातील प्रजननक्षम डासांचे प्रमाण आहे.
कालांतराने कोव्ह व्हेक्टर लोकसंख्येच्या प्रतिकारशक्तीच्या स्वरूपातील बदलांचे निरीक्षण करण्यासाठी, डब्ल्यूएचओने प्रत्येक प्रायोगिक झोपडी चाचणीच्या त्याच वर्षी (२०२१, २०२२, २०२३) अभ्यासाधीन आयटीएनमधील एआय (AI) संवेदनशीलता तपासण्यासाठी आणि निकालांच्या अन्वयार्थासाठी माहिती मिळवण्याकरिता इन विट्रो आणि व्हायल बायोएसे आयोजित केले. इन विट्रो अभ्यासांमध्ये, या कीटकनाशकांप्रति संवेदनशीलता तपासण्यासाठी डासांना अल्फा-सायपरमेथ्रिन (०.०५%) आणि डेल्टामेथ्रिन (०.०५%) च्या निश्चित सांद्रतेने प्रक्रिया केलेल्या फिल्टर पेपर्सवर, तसेच सीएफपी (१०० μg/बाटली) आणि पीपीएफ (१०० μg/बाटली) च्या निश्चित सांद्रतेने लेपित केलेल्या बाटल्यांसमोर ठेवण्यात आले. पायरेथ्रॉइड प्रतिकारशक्तीची तीव्रता तपासण्यासाठी डासांना अल्फा-सायपरमेथ्रिन आणि डेल्टामेथ्रिनच्या ५-पट (०.२५%) आणि १०-पट (०.५०%) भिन्न सांद्रतेसमोर ठेवण्यात आले. शेवटी, पायरेथ्रॉइड प्रतिकारशक्तीमध्ये PBO सहक्रिया आणि सायटोक्रोम P450 मोनोऑक्सिजेनेज (P450) च्या अतिअभिव्यक्तीच्या योगदानाचे मूल्यांकन करण्यासाठी, डासांना α-सायपरमेथ्रिन (०.०५%) आणि डेल्टामेथ्रिन (०.०५%) च्या वेगवेगळ्या सांद्रतांमध्ये, तसेच PBO (४%) मध्ये पूर्व-संपर्कात ठेवण्यात आले. WHO ट्यूब चाचणीसाठी वापरण्यात आलेला फिल्टर पेपर युनिव्हर्सिटी सायन्स मलेशियाकडून खरेदी करण्यात आला होता. CFP आणि PPF वापरून WHO बायोअसे चाचणीच्या कुप्या WHO च्या शिफारशींनुसार तयार करण्यात आल्या.
जैविक चाचण्यांसाठी वापरण्यात आलेले डास, प्रायोगिक झोपड्यांजवळील प्रजनन स्थळांवरून अळीच्या अवस्थेत गोळा केले गेले आणि नंतर त्यांना प्रौढ होईपर्यंत वाढवण्यात आले. प्रत्येक वेळी, प्रत्येक उपचारासाठी किमान १०० डासांना ६० मिनिटांसाठी ठेवण्यात आले, ज्यात प्रत्येक ट्यूब/बाटलीसाठी ४ प्रतिकृती आणि अंदाजे २५ डास होते. पायरेथ्रॉइड आणि सीएफपीच्या प्रयोगांसाठी, ३-५ दिवसांच्या उपाशी डासांचा वापर करण्यात आला, तर पीपीएफसाठी, अंडजनन उत्तेजित करण्याकरिता आणि डासांच्या प्रजननावरील पीपीएफचा परिणाम तपासण्याकरिता, ५-७ दिवसांच्या रक्तशोषक डासांचा वापर करण्यात आला. नियंत्रक म्हणून सिलिकॉन तेलाने भिजवलेला फिल्टर पेपर, शुद्ध पीबीओ (४%), आणि ॲसिटोन-लेपित बाटल्या वापरून समांतर प्रयोग करण्यात आले. प्रयोगाच्या शेवटी, डासांना उपचार न केलेल्या पात्रांमध्ये स्थानांतरित करण्यात आले आणि १०% (वजन/आकारमान) ग्लुकोज द्रावणात भिजवलेल्या कापसाच्या बोळ्यासमोर ठेवण्यात आले. पायरेथ्रॉइडच्या संपर्कात आल्यानंतर २४ तासांनी आणि सीएफपी व पीपीएफच्या संपर्कात आल्यानंतर ७२ तासांपर्यंत दर २४ तासांनी मृत्यूची नोंद केली गेली. पीपीएफच्या संवेदनशीलतेचे मूल्यांकन करण्यासाठी, विलंबित मृत्यूची नोंद झाल्यानंतर, पीपीएफच्या संपर्कात आलेले जिवंत डास आणि संबंधित नकारात्मक नियंत्रणांचे विच्छेदन केले गेले, संयुक्त सूक्ष्मदर्शकाचा वापर करून अंडाशयाच्या विकासाचे निरीक्षण केले गेले आणि अंड्यांच्या विकासाच्या क्रिस्टोफर्स अवस्थेनुसार प्रजननक्षमतेचे मूल्यांकन केले गेले [२८, ३०]. जर अंडी क्रिस्टोफर्स अवस्था V पर्यंत पूर्णपणे विकसित झाली, तर डासांना प्रजननक्षम म्हणून वर्गीकृत केले गेले आणि जर अंडी पूर्णपणे विकसित झाली नाहीत आणि अवस्था I-IV मध्ये राहिली, तर डासांना वंध्य म्हणून वर्गीकृत केले गेले.
वर्षाच्या प्रत्येक वेळी, WHO च्या शिफारशींमध्ये [22] नमूद केलेल्या ठिकाणी नवीन आणि शेतात वापरलेल्या जुन्या जाळ्यांमधून 30 × 30 सेमीचे तुकडे कापण्यात आले. कापल्यानंतर, जाळ्यांना लेबल लावून, ॲल्युमिनियम फॉइलमध्ये गुंडाळण्यात आले आणि कापडात AI चे स्थलांतर रोखण्यासाठी 4 ± 2 °C तापमानावर रेफ्रिजरेटरमध्ये ठेवण्यात आले. त्यानंतर, त्यांच्या सेवाकाळात एकूण AI सामग्रीमधील बदल मोजण्यासाठी रासायनिक विश्लेषणाकरिता या जाळ्या बेल्जियममधील वॅलून कृषी संशोधन केंद्रात पाठवण्यात आल्या. वापरलेल्या विश्लेषणात्मक पद्धती (कीटकनाशक विश्लेषणासाठी आंतरराष्ट्रीय सहकारी समितीने शिफारस केलेल्या पद्धतींवर आधारित) पूर्वी वर्णन केल्या आहेत [25, 31].
प्रायोगिक झोपडी चाचणीच्या माहितीसाठी, प्रत्येक चाचणीमध्ये प्रत्येक उपचाराकरिता झोपडीच्या वेगवेगळ्या भागांमधील जिवंत/मृत, चावणारे/न चावणारे, आणि प्रजननक्षम/वंध्य डासांची एकूण संख्या एकत्र करून विविध प्रमाणशीर परिणाम (७२-तासांतील मृत्यूदर, चावणे, बाह्यपरजीवीता, जाळ्यात अडकणे, प्रजननक्षमता) आणि त्यांचे संबंधित ९५% विश्वासार्हता अंतराल (CIs) मोजण्यात आले. या प्रमाणशीर द्विपदी परिणामांसाठी उपचारांमधील फरक लॉजिस्टिक रिग्रेशन वापरून विश्लेषित केले गेले, तर संख्यात्मक परिणामांमधील फरक निगेटिव्ह बायोनोमियल रिग्रेशन वापरून विश्लेषित केले गेले. दर १२ महिन्यांनी उपचारांची दोन आवर्तने आयोजित केली जात असल्यामुळे आणि काही उपचार अनेक चाचण्यांमध्ये तपासले जात असल्यामुळे, प्रत्येक उपचार किती दिवस तपासला गेला यानुसार डासांच्या प्रवेशाचे विश्लेषण समायोजित केले गेले. सर्व वेळेच्या बिंदूंसाठी एकच अंदाज मिळवण्यासाठी प्रत्येक परिणामासाठी नवीन आयटीएनचे (ITN) देखील विश्लेषण केले गेले. उपचाराच्या मुख्य स्पष्टीकरणात्मक चलाव्यतिरिक्त, प्रत्येक मॉडेलमध्ये झोपडी, झोपणारा, चाचणी कालावधी, आयटीएन छिद्र निर्देशांक आणि दिवस हे निश्चित परिणाम म्हणून समाविष्ट केले गेले, जेणेकरून वैयक्तिक झोपणाऱ्याची आणि झोपडीची आकर्षकता, हंगाम, मच्छरदाणीची स्थिती आणि अतिरिक्त फैलाव यांमधील फरकांमुळे होणारी तफावत नियंत्रित करता येईल. डासांचा मृत्यूदर आणि प्रजननक्षमता या प्राथमिक परिणामांवर, केवळ पायरेथ्रॉइड असलेल्या इंटरसेप्टर® नेटच्या तुलनेत नवीन पिढीच्या आयटीएनच्या (ITN) परिणामाचा अंदाज घेण्यासाठी रिग्रेशन विश्लेषणातून समायोजित ऑड्स रेशो (ORs) आणि संबंधित ९५% विश्वासार्हता अंतराल प्राप्त झाले. प्राथमिक आणि दुय्यम परिणामांच्या सर्व जोडीदार तुलनांसाठी, ५% स्तरावर सांख्यिकीय महत्त्व दर्शवणारी संक्षिप्त अक्षरे देण्यासाठी मॉडेल्समधील पी-व्हॅल्यूजचा (P values) देखील वापर करण्यात आला. सर्व रिग्रेशन विश्लेषणे स्टेटा (Stata) आवृत्ती १८ मध्ये करण्यात आली.
जागतिक आरोग्य संघटनेच्या शिफारशींनुसार, इन विट्रो आणि बॉटल बायोअसेमध्ये निरीक्षण केलेल्या मृत्यूदर आणि प्रजननक्षमतेच्या आधारावर कोवेस व्हेक्टर समूहांच्या संवेदनशीलता तपासण्यात आली. रासायनिक विश्लेषणाच्या निकालांमधून आयटीएनच्या तुकड्यांमधील एकूण सक्रिय घटकाचे (AI) प्रमाण मिळाले, ज्याचा उपयोग दरवर्षी प्रत्येक वेळी, नवीन जाळ्यांच्या तुलनेत जुन्या जाळ्यांमधील सक्रिय घटक टिकून राहण्याच्या दराची गणना करण्यासाठी केला गेला. सर्व डेटा प्रमाणित नमुन्यांवर हाताने नोंदवला गेला आणि नंतर मायक्रोसॉफ्ट एक्सेल डेटाबेसमध्ये दुहेरी पद्धतीने प्रविष्ट केला गेला.
बेनिनच्या आरोग्य मंत्रालयाच्या नीती समितीने (क्र. 6/30/MS/DC/DRFMT/CNERS/SA), लंडन स्कूल ऑफ हायजीन अँड ट्रॉपिकल मेडिसिन (LSHTM) च्या समितीने (क्र. 16237) आणि जागतिक आरोग्य संघटनेच्या समितीने (क्र. ERC.0003153) स्वयंसेवकांचा समावेश असलेल्या एका प्रायोगिक झोपडी चाचणीच्या आयोजनास मान्यता दिली. अभ्यासात सहभागी होण्यापूर्वी सर्व स्वयंसेवकांकडून लेखी संमती घेण्यात आली. मलेरियाचा धोका कमी करण्यासाठी सर्व स्वयंसेवकांना मोफत रासायनिक प्रतिबंधक उपचार देण्यात आले आणि ज्या स्वयंसेवकाला तापाची लक्षणे किंवा चाचणी उत्पादनामुळे प्रतिकूल प्रतिक्रिया जाणवेल, त्याचे मूल्यांकन करण्यासाठी चाचणीदरम्यान एक परिचारिका कर्तव्यावर होती.
प्रायोगिक झोपड्यांमधील संपूर्ण निकाल, प्रत्येक प्रायोगिक गटासाठी जिवंत/मृत, उपाशी/रक्तपान केलेले आणि प्रजननक्षम/वंध्य डासांची एकूण संख्या तसेच वर्णनात्मक सांख्यिकी यांचा सारांश पुरवणी सामग्री म्हणून सादर केला आहे (तक्ता S1).
बेनिनमधील कोवा येथील एका प्रायोगिक झोपडीत, जंगली पायरेथ्रॉइड-प्रतिरोधक ॲनोफिलीस गॅम्बिया डासांचे रक्त शोषण रोखण्यात आले. उपचार न केलेल्या नियंत्रक गटांकडून आणि नवीन जाळ्यांकडून मिळालेला डेटा सर्व चाचण्यांमधून एकत्रित करून परिणामकारकतेचा एकच अंदाज काढण्यात आला. लॉजिस्टिक रिग्रेशन विश्लेषणानुसार, समान अक्षरे असलेले स्तंभ ५% पातळीवर लक्षणीयरीत्या भिन्न नव्हते (p > 0.05). एरर बार ९५% विश्वासार्हता अंतराल दर्शवतात.
बेनिनमधील कोवा येथील एका प्रायोगिक झोपडीत प्रवेश करणाऱ्या जंगली पायरेथ्रॉइड-प्रतिरोधक ॲनोफिलीस गॅम्बिया डासांचा मृत्यूदर. परिणामकारकतेचा एकच अंदाज देण्यासाठी, उपचार न केलेल्या नियंत्रक नमुन्यांचा आणि नवीन जाळ्यांचा डेटा सर्व चाचण्यांमधून एकत्रित करण्यात आला. लॉजिस्टिक रिग्रेशन विश्लेषणानुसार, समान अक्षरे असलेले स्तंभ ५% पातळीवर लक्षणीयरीत्या भिन्न नव्हते (p > 0.05). एरर बार ९५% विश्वासार्हता अंतराल दर्शवतात.
ऑड्स रेशो हा केवळ पायरेथ्रॉइड असलेल्या मच्छरदाण्यांच्या तुलनेत नवीन पिढीच्या मच्छरदाण्यांमुळे होणाऱ्या मृत्यूदरातील फरक दर्शवतो. तुटक रेषा १ चा ऑड्स रेशो दर्शवते, जो मृत्यूदरात कोणताही फरक नसल्याचे सूचित करतो. १ पेक्षा जास्त असलेला ऑड्स रेशो नवीन पिढीच्या मच्छरदाण्यांमुळे जास्त मृत्यूदर असल्याचे दर्शवतो. परिणामकारकतेचा एकच अंदाज घेण्यासाठी नवीन पिढीच्या मच्छरदाण्यांचा डेटा सर्व चाचण्यांमधून एकत्रित करण्यात आला. एरर बार ९५% विश्वासार्हता अंतराल दर्शवतात.
जरी इंटरसेप्टर® ने चाचणी केलेल्या सर्व आयटीएन (ITNs) मध्ये सर्वात कमी मृत्यूदर दर्शवला असला तरी, क्षेत्रीय वापरामुळे त्याच्या वेक्टर मृत्यूदरावरील परिणामावर कोणताही नकारात्मक परिणाम झाला नाही. खरं तर, नवीन इंटरसेप्टर® मुळे १२% मृत्यूदर दिसून आला, तर क्षेत्रीय वापरामुळे जुन्या झालेल्या जाळ्यांमध्ये १२ महिन्यांनी (१७%, p=०.००६) आणि २४ महिन्यांनी (१७%, p=०.००४) किंचित सुधारणा दिसून आली, आणि ३६ महिन्यांनी तो पुन्हा नवीन जाळ्यांच्या पातळीवर (११%, p=०.०५) पोहोचला. याउलट, कीटकनाशक-उपचारित जाळ्यांच्या पुढच्या पिढीसाठी मृत्यूदर वापरानंतर कालांतराने हळूहळू कमी झाला. ही घट इंटरसेप्टर® G2 मध्ये सर्वात जास्त स्पष्ट होती, जिथे नवीन जाळ्यांमधील मृत्यूदर ५८% वरून १२ महिन्यांत ३६% पर्यंत कमी झाला (p < ०.००१).< 0.001), 24 महिन्यांत 31% (पी< 0.001), आणि 36 महिन्यांत 20% (पी < 0.001)< 0.001). नवीन PermaNet® 3.0 मुळे मृत्यूदर ३७% पर्यंत कमी झाला, जो १२ महिन्यांत लक्षणीयरीत्या २०% पर्यंत कमी झाला (पी < 0.001).< 0.001), 24 महिन्यांत 16% (पी< 0.001), आणि 36 महिन्यांत 18% (पी < 0.001)< 0.001). रॉयल गार्ड® च्या बाबतीतही असाच कल दिसून आला, नवीन मेशमुळे मृत्यूदरात ३३% घट झाली, त्यानंतर १२ महिन्यांत त्यात लक्षणीय घट होऊन तो २१% झाला (पी < 0.001).< 0.001), 24 महिन्यांत 17% (पी< 0.001) आणि 36 महिन्यांत 15% (पी < 0.001)< ०.००१).
बेनिनमधील क्वा येथील एका प्रायोगिक झोपडीत प्रवेश करणाऱ्या जंगली पायरेथ्रॉइड-प्रतिरोधक ॲनोफिलीस गॅम्बिया डासांच्या प्रजननक्षमतेत घट. परिणामकारकतेचा एकच अंदाज देण्यासाठी, उपचार न केलेल्या नियंत्रक नमुन्यांचा आणि नवीन जाळ्यांचा डेटा सर्व चाचण्यांमधून एकत्रित करण्यात आला. लॉजिस्टिक रिग्रेशन विश्लेषणानुसार, समान अक्षरे असलेले बार ५% पातळीवर (p > 0.05) लक्षणीयरीत्या भिन्न नव्हते. एरर बार ९५% विश्वासार्हता अंतराल दर्शवतात.
ऑड्स रेशो हे केवळ पायरेथ्रॉइड असलेल्या मच्छरदाण्यांच्या तुलनेत नवीन पिढीच्या मच्छरदाण्यांमधील प्रजननक्षमतेतील फरक दर्शवतात. तुटक रेषा १ चे गुणोत्तर दर्शवते, जे प्रजननक्षमतेत कोणताही फरक नसल्याचे सूचित करते. ऑड्स रेशो< 1 हे नवीन पिढीच्या जाळ्यांमुळे प्रजननक्षमतेत अधिक घट झाल्याचे दर्शवते. परिणामकारकतेचा एकच अंदाज घेण्यासाठी, नवीन पिढीच्या मच्छरदाण्यांचा डेटा सर्व चाचण्यांमधून एकत्रित करण्यात आला. एरर बार ९५% विश्वासार्हता अंतराल दर्शवतात.