भारतातील व्हिसेरल लेशमॅनिॲसिसचा वाहक असलेल्या फ्लेबोटोमस अर्जेंटाइप्सची सायपरमेथ्रिनप्रती असलेली संवेदनशीलता CDC बॉटल बायोअसे वापरून तपासणे | कीटक आणि वाहक

भारतीय उपखंडात 'काळा-आजार' म्हणून ओळखला जाणारा व्हिसेरल लेशमॅनिॲसिस (VL) हा 'लेशमॅनिया' नावाच्या कशाभिकाधारी प्रोटोझोआमुळे होणारा एक परजीवी रोग आहे, ज्यावर त्वरित उपचार न केल्यास तो प्राणघातक ठरू शकतो. आग्नेय आशियामध्ये, 'फ्लेबोटोमस अर्जेंटिप्स' ही वाळूमाशी (सँडफ्लाय) VL ची एकमेव निश्चित वाहक आहे, जिथे इनडोअर रेसिड्युअल स्प्रेइंग (IRS) या कृत्रिम कीटकनाशकाद्वारे त्यावर नियंत्रण मिळवले जाते. VL नियंत्रण कार्यक्रमांमध्ये डीडीटीच्या वापरामुळे वाळूमाशीमध्ये प्रतिकारशक्ती निर्माण झाली आहे, त्यामुळे डीडीटीच्या जागी अल्फा-सायपरमेथ्रिन हे कीटकनाशक वापरले जात आहे. तथापि, अल्फा-सायपरमेथ्रिन डीडीटीप्रमाणेच कार्य करते, त्यामुळे या कीटकनाशकाच्या वारंवार संपर्कात आल्याने निर्माण होणाऱ्या तणावाखाली वाळूमाशीमध्ये प्रतिकारशक्ती निर्माण होण्याचा धोका वाढतो. या अभ्यासात, आम्ही CDC बॉटल बायोएसे वापरून जंगली डास आणि त्यांच्या F1 पिढीची संवेदनशीलता तपासली.
आम्ही भारतातील बिहार राज्यातील मुझफ्फरपूर जिल्ह्यातील १० गावांमधून डास गोळा केले. आठ गावांमध्ये उच्च-क्षमतेच्या डासांचा वापर सुरूच होता.सायपरमेथ्रिनघरातील फवारणीसाठी, एका गावाने उच्च-शक्तीच्या सायपरमेथ्रिनचा वापर थांबवला, आणि एका गावाने घरातील फवारणीसाठी उच्च-शक्तीच्या सायपरमेथ्रिनचा वापर कधीच केला नाही. गोळा केलेल्या डासांना एका पूर्वनिर्धारित निदान मात्रेमध्ये एका निश्चित वेळेसाठी (४० मिनिटांसाठी ३ μg/ml) ठेवण्यात आले, आणि संपर्कात ठेवल्यानंतर २४ तासांनी डास बेशुद्ध होण्याचे प्रमाण व मृत्यूदर नोंदवण्यात आला.
जंगली डासांचा मृत्यूदर ९१.१९% ते ९९.४७% पर्यंत होता, आणि त्यांच्या F1 पिढीचा मृत्यूदर ९१.७०% ते ९८.८९% पर्यंत होता. संपर्कात आल्यानंतर चोवीस तासांनी, जंगली डासांचा मृत्यूदर ८९.३४% ते ९८.९३% पर्यंत होता, आणि त्यांच्या F1 पिढीचा मृत्यूदर ९०.१६% ते ९८.३३% पर्यंत होता.
या अभ्यासाच्या निष्कर्षांवरून असे दिसून येते की पी. अर्जेंटिप्समध्ये प्रतिकारशक्ती विकसित होऊ शकते, त्यामुळे एकदा निर्मूलन साध्य झाल्यावर नियंत्रण कायम ठेवण्यासाठी सतत देखरेख आणि दक्षता ठेवण्याची गरज आहे.
भारतीय उपखंडात 'काळा-आजार' म्हणून ओळखला जाणारा व्हिसेरल लेशमॅनिॲसिस (VL) हा एक परजीवी रोग आहे. हा रोग लेशमॅनिया नावाच्या कशाभिकाधारी प्रोटोझोआमुळे होतो आणि संक्रमित मादी वाळूमाशीच्या (डिप्टेरा: मायर्मेकोफागा) चाव्याद्वारे पसरतो. आग्नेय आशियामध्ये वाळूमाशी हा VL चा एकमेव निश्चित वाहक आहे. भारत VL चे निर्मूलन करण्याच्या ध्येयाच्या जवळ पोहोचला आहे. तथापि, निर्मूलनानंतर रोगाचे प्रमाण कमी ठेवण्यासाठी, संभाव्य प्रसार रोखण्याकरिता वाहकांची संख्या कमी करणे अत्यंत महत्त्वाचे आहे.
आग्नेय आशियामध्ये, कृत्रिम कीटकनाशकांचा वापर करून घरातील अवशिष्ट फवारणी (IRS) द्वारे डासांवर नियंत्रण मिळवले जाते. सिल्व्हरलेग्जच्या लपून राहण्याच्या सवयीमुळे, घरातील अवशिष्ट फवारणीद्वारे कीटकनाशक नियंत्रणासाठी ते एक योग्य लक्ष्य ठरतात [1]. भारतातील राष्ट्रीय मलेरिया नियंत्रण कार्यक्रमांतर्गत डायक्लोरोडायफेनिलट्रायक्लोरोइथेन (DDT) च्या घरातील अवशिष्ट फवारणीमुळे डासांच्या लोकसंख्येवर नियंत्रण मिळवण्यात आणि व्हिसेरल लेशमॅनिॲसिस (VL) ची प्रकरणे लक्षणीयरीत्या कमी करण्यात महत्त्वपूर्ण परिणाम दिसून आले आहेत [2]. VL च्या या अनियोजित नियंत्रणामुळे भारतीय VL निर्मूलन कार्यक्रमाला सिल्व्हरलेग्ज नियंत्रणाची प्राथमिक पद्धत म्हणून घरातील अवशिष्ट फवारणीचा अवलंब करण्यास प्रवृत्त केले. २००५ मध्ये, भारत, बांगलादेश आणि नेपाळच्या सरकारांनी २०१५ पर्यंत VL चे निर्मूलन करण्याच्या उद्दिष्टाने एका सामंजस्य करारावर स्वाक्षरी केली [3]. निर्मूलनाच्या प्रयत्नांमध्ये, वाहक नियंत्रण आणि मानवी प्रकरणांचे जलद निदान व उपचार यांचा समावेश होता, आणि २०१५ पर्यंत एकत्रीकरण टप्प्यात प्रवेश करण्याचे उद्दिष्ट होते, जे नंतर २०१७ आणि त्यानंतर २०२० पर्यंत सुधारित करण्यात आले. [4] दुर्लक्षित उष्णकटिबंधीय रोगांचे निर्मूलन करण्याच्या नवीन जागतिक रोडमॅपमध्ये 2030 पर्यंत VL चे निर्मूलन समाविष्ट आहे. [5]
भारत बीसीव्हीडीच्या निर्मूलनोत्तर टप्प्यात प्रवेश करत असताना, बीटा-सायपरमेथ्रिनला लक्षणीय प्रतिकारशक्ती विकसित होणार नाही याची खात्री करणे अत्यावश्यक आहे. या प्रतिकारशक्तीचे कारण असे आहे की डीडीटी आणि सायपरमेथ्रिन या दोन्हींची कार्यपद्धती सारखीच आहे, म्हणजेच, ते व्हीजीएससी प्रथिनाला लक्ष्य करतात [21]. त्यामुळे, अत्यंत प्रभावी सायपरमेथ्रिनच्या नियमित संपर्कामुळे होणाऱ्या ताणामुळे सँडफ्लायमध्ये प्रतिकारशक्ती विकसित होण्याचा धोका वाढू शकतो. म्हणूनच, या कीटकनाशकाला प्रतिरोधक असलेल्या सँडफ्लायच्या संभाव्य लोकसंख्येचे निरीक्षण करणे आणि ओळखणे अत्यावश्यक आहे. या संदर्भात, चौबे आणि त्यांच्या सहकाऱ्यांनी [20] निश्चित केलेल्या निदानात्मक मात्रा आणि संपर्काच्या कालावधीचा वापर करून जंगली सँडफ्लायच्या संवेदनशीलता स्थितीचे निरीक्षण करणे हा या अभ्यासाचा उद्देश होता. चौबे आणि त्यांच्या सहकाऱ्यांनी भारतातील बिहारमधील मुझफ्फरपूर जिल्ह्यातील वेगवेगळ्या गावांमधील पी. अर्जेंटिपेसचा अभ्यास केला, जिथे सायपरमेथ्रिनने उपचारित इनडोअर फवारणी प्रणालीचा (सतत आयपीएस गावे) सतत वापर केला जात होता. सायपरमेथ्रिन-उपचारित इनडोअर फवारणी प्रणाली वापरणे बंद केलेल्या गावांमधील (माजी आयपीएस गावे) आणि सायपरमेथ्रिन-उपचारित इनडोअर फवारणी प्रणाली कधीही न वापरलेल्या गावांमधील (गैर-आयपीएस गावे) जंगली पी. अर्जेंटाइप्सच्या संवेदनशीलता स्थितीची तुलना सीडीसी बॉटल बायोएसे वापरून करण्यात आली.
अभ्यासासाठी दहा गावांची निवड करण्यात आली (आकृती १; तक्ता १), त्यापैकी आठ गावांमध्ये सिंथेटिक पायरेथ्रॉइड्सची (हायपरमेथ्रिन; 'सतत हायपरमेथ्रिन फवारणी करणारी गावे' म्हणून ओळखली जाणारी) घरातील फवारणी सातत्याने होत असल्याचा इतिहास होता आणि गेल्या ३ वर्षांत या गावांमध्ये व्हिसेरल लेशमॅनिॲसिसचे (VL) रुग्ण (किमान एक रुग्ण) आढळले होते. अभ्यासातील उर्वरित दोन गावांपैकी, बीटा-सायपरमेथ्रिनची घरातील फवारणी न करणारे एक गाव (घरातील फवारणी न करणारे गाव) नियंत्रण गाव म्हणून निवडण्यात आले आणि बीटा-सायपरमेथ्रिनची घरातील फवारणी अधूनमधून होत असलेले दुसरे गाव (अधूनमधून घरातील फवारणी करणारे गाव/पूर्वी घरातील फवारणी होणारे गाव) नियंत्रण गाव म्हणून निवडण्यात आले. या गावांची निवड आरोग्य विभाग आणि घरातील फवारणी पथक यांच्याशी समन्वय साधून आणि मुझफ्फरपूर जिल्ह्यातील घरातील फवारणी सूक्ष्म कृती योजनेच्या प्रमाणीकरणाच्या आधारावर करण्यात आली.
अभ्यासात समाविष्ट असलेल्या गावांची (१-१०) स्थाने दर्शवणारा मुझफ्फरपूर जिल्ह्याचा भौगोलिक नकाशा. अभ्यासाची ठिकाणे: १, मणिफुलकाहा; २, रामदास मझौली; ३, मधुबनी; ४, आनंदपूर हारुनी; ५, पांडे; ६, हिरापूर; ७, माधोपूर हजारी; ८, हमीदपूर; ९, नूनफारा; १०, सिमारा. हा नकाशा QGIS सॉफ्टवेअर (आवृत्ती ३.३०.३) आणि ओपन असेसमेंट शेपफाईल वापरून तयार करण्यात आला आहे.
एक्सपोजर प्रयोगांसाठीच्या बाटल्या चौबे एट अल. [20] आणि डेनलिंगर एट अल. [22] यांच्या पद्धतींनुसार तयार करण्यात आल्या. थोडक्यात, प्रयोगाच्या एक दिवस आधी 500 मिली काचेच्या बाटल्या तयार करण्यात आल्या आणि बाटल्यांच्या तळाला, भिंतींना आणि झाकणाला कीटकनाशकाचे ॲसिटोन द्रावण (2.0 मिली) लावून बाटल्यांच्या आतील भिंतींना सूचित कीटकनाशकाचा (α-सायपरमेथ्रिनचा डायग्नोस्टिक डोस 3 μg/mL होता) लेप देण्यात आला. त्यानंतर प्रत्येक बाटली 30 मिनिटांसाठी एका मेकॅनिकल रोलरवर वाळवण्यात आली. या दरम्यान, ॲसिटोनचे बाष्पीभवन होऊ देण्यासाठी झाकण हळू हळू उघडावे. 30 मिनिटे वाळवल्यानंतर, झाकण काढून टाकावे आणि सर्व ॲसिटोनचे बाष्पीभवन होईपर्यंत बाटली फिरवावी. त्यानंतर बाटल्या रात्रभर वाळण्यासाठी उघड्या ठेवण्यात आल्या. प्रत्येक प्रतिकृती चाचणीसाठी, एक बाटली, जी नियंत्रक म्हणून वापरली गेली, तिला 2.0 मिली ॲसिटोनचा लेप देण्यात आला. डेनलिंगर एट अल. यांनी वर्णन केलेल्या प्रक्रियेनुसार योग्य स्वच्छता केल्यानंतर सर्व बाटल्या संपूर्ण प्रयोगादरम्यान पुन्हा वापरण्यात आल्या. आणि जागतिक आरोग्य संघटना [22, 23].
कीटकनाशक तयार केल्याच्या दुसऱ्या दिवशी, पिंजऱ्यांमधून ३०-४० जंगली डास (उपाशी माद्या) काढून लहान बाटल्यांमध्ये भरण्यात आले आणि प्रत्येक बाटलीत हळुवारपणे फुंकर मारण्यात आली. नियंत्रक नमुन्यासह, कीटकनाशक लावलेल्या प्रत्येक बाटलीसाठी अंदाजे तितक्याच माश्या वापरण्यात आल्या. प्रत्येक गावात ही प्रक्रिया किमान पाच ते सहा वेळा पुन्हा करण्यात आली. कीटकनाशकाच्या संपर्कात ४० मिनिटे ठेवल्यानंतर, खाली पडलेल्या माश्यांची संख्या नोंदवण्यात आली. सर्व माश्या एका यांत्रिक ॲस्पिरेटरने पकडण्यात आल्या, बारीक जाळीने झाकलेल्या पाइंटच्या पुठ्ठ्याच्या डब्यांमध्ये ठेवण्यात आल्या आणि उपचार न केलेल्या वसाहतींप्रमाणेच त्याच आर्द्रता व तापमानाच्या परिस्थितीत, त्याच अन्न स्रोतासह (३०% साखरेच्या द्रावणात भिजवलेले कापसाचे गोळे) एका वेगळ्या इनक्यूबेटरमध्ये ठेवण्यात आल्या. कीटकनाशकाच्या संपर्कात आल्यानंतर २४ तासांनी मृत्यूदराची नोंद करण्यात आली. प्रजातीची ओळख निश्चित करण्यासाठी सर्व डासांचे विच्छेदन करून तपासणी करण्यात आली. हीच प्रक्रिया F1 पिढीतील माश्यांसोबतही करण्यात आली. कीटकनाशकाच्या संपर्कात आल्यानंतर २४ तासांनी खाली पडण्याचे आणि मृत्यूचे प्रमाण नोंदवण्यात आले. जर नियंत्रण बाटल्यांमधील मृत्यूदर < 5% असेल, तर प्रतिकृतींमध्ये मृत्यूदराची कोणतीही दुरुस्ती केली गेली नाही. जर नियंत्रण बाटलीतील मृत्यूदर ≥ 5% आणि ≤ 20% असेल, तर त्या प्रतिकृतीच्या चाचणी बाटल्यांमधील मृत्यूदर अॅबॉटच्या सूत्राचा वापर करून दुरुस्त केला गेला. जर नियंत्रण गटातील मृत्यूदर 20% पेक्षा जास्त असेल, तर संपूर्ण चाचणी गट रद्द करण्यात आला [24, 25, 26].
जंगली पकडलेल्या पी. अर्जेंटिपेस डासांची सरासरी मृत्यूदर. एरर बार सरासरीच्या मानक त्रुटी दर्शवतात. आलेखावरील दोन लाल आडव्या रेषांचा छेदनबिंदू (अनुक्रमे 90% आणि 98% मृत्यूदर) तो मृत्यूदर दर्शवतो ज्यामध्ये प्रतिकारशक्ती विकसित होऊ शकते.[25]
जंगली पकडलेल्या पी. अर्जेंटिपेसच्या F1 संततीचा सरासरी मृत्यूदर. त्रुटी बार सरासरीच्या मानक त्रुटी दर्शवतात. दोन लाल आडव्या रेषांनी (अनुक्रमे 90% आणि 98% मृत्यूदर) छेदलेले वक्र मृत्यूदराची श्रेणी दर्शवतात ज्यावर प्रतिकारशक्ती विकसित होऊ शकते [25].
नियंत्रण/आयआरएस नसलेल्या गावातील (मणीफुलकाहा) डास कीटकनाशकांना अत्यंत संवेदनशील असल्याचे आढळून आले. बेशुद्ध केल्यानंतर आणि कीटकनाशकाच्या संपर्कात आणल्यानंतर २४ तासांनी, जंगली डासांमधील सरासरी मृत्यूदर (±एसई) अनुक्रमे ९९.४७ ± ०.५२% आणि ९८.९३ ± ०.६५% होता, आणि एफ१ पिढीतील डासांचा सरासरी मृत्यूदर अनुक्रमे ९८.८९ ± १.११% आणि ९८.३३ ± १.११% होता (तक्ते २, ३).
या अभ्यासाच्या निष्कर्षांवरून असे दिसून येते की, ज्या गावांमध्ये पायरेथ्रॉइड (एसपी) अल्फा-सायपरमेथ्रिनचा नियमितपणे वापर केला जात होता, तेथील सिल्व्हर-लेग्ड सँड फ्लायमध्ये या कीटकनाशकाविरुद्ध प्रतिकारशक्ती विकसित होऊ शकते. याउलट, आयआरएस/नियंत्रण कार्यक्रमांतर्गत न आलेल्या गावांमधून गोळा केलेल्या सिल्व्हर-लेग्ड सँड फ्लाय अत्यंत संवेदनशील असल्याचे आढळले. वापरल्या जाणाऱ्या कीटकनाशकांच्या परिणामकारकतेचे निरीक्षण करण्यासाठी जंगली सँड फ्लायच्या लोकसंख्येच्या संवेदनशीलतेवर लक्ष ठेवणे महत्त्वाचे आहे, कारण ही माहिती कीटकनाशक प्रतिकारशक्तीचे व्यवस्थापन करण्यास मदत करू शकते. या कीटकनाशकाचा वापर करून केलेल्या आयआरएसमुळे निर्माण झालेल्या ऐतिहासिक निवड दबावामुळे बिहारच्या स्थानिक भागांतील सँड फ्लायमध्ये डीडीटी प्रतिकारशक्तीचे उच्च प्रमाण नियमितपणे नोंदवले गेले आहे [1].
आम्हाला आढळले की पी. अर्जेंटिप्स पायरेथ्रॉइड्ससाठी अत्यंत संवेदनशील आहे, आणि भारत, बांगलादेश आणि नेपाळमधील क्षेत्रीय चाचण्यांमध्ये असे दिसून आले की सायपरमेथ्रिन किंवा डेल्टामेथ्रिनच्या संयोजनात वापरल्यास आयआरएसमध्ये उच्च कीटकशास्त्रीय परिणामकारकता होती [१९, २६, २७, २८, २९]. अलीकडेच, रॉय आणि इतरांनी [१८] अहवाल दिला की नेपाळमध्ये पी. अर्जेंटिप्सने पायरेथ्रॉइड्सला प्रतिकारशक्ती विकसित केली आहे. आमच्या क्षेत्रीय संवेदनशीलता अभ्यासात असे दिसून आले की आयआरएस न वापरलेल्या गावांमधून गोळा केलेल्या सिल्व्हरलेग्ड सँड फ्लाय अत्यंत संवेदनशील होत्या, परंतु अधूनमधून/पूर्वी आयआरएस वापरलेल्या आणि सतत आयआरएस वापरलेल्या गावांमधून गोळा केलेल्या माश्या (आनंदपूर-हारुनी येथील सँड फ्लाय वगळता, जिथे संपर्कात आल्यानंतर २४ तासांत ८९.३४% मृत्यूदर होता, इतर ठिकाणी मृत्यूदर ९०% ते ९७% पर्यंत होता) अत्यंत प्रभावी सायपरमेथ्रिनला प्रतिरोधक असण्याची शक्यता होती [२५]. या प्रतिकारशक्तीच्या विकासामागील एक संभाव्य कारण म्हणजे घरातील नियमित फवारणी (IRS) आणि रुग्ण-आधारित स्थानिक फवारणी कार्यक्रमांमुळे निर्माण झालेला दबाव, जे स्थानिक क्षेत्र/तालुके/गावांमध्ये काला-आजारच्या प्रादुर्भावाचे व्यवस्थापन करण्यासाठी प्रमाणित कार्यपद्धती आहेत (प्रादुर्भाव तपासणी आणि व्यवस्थापनासाठी प्रमाणित कार्यप्रणाली [30]). या अभ्यासाचे निष्कर्ष अत्यंत प्रभावी सायपरमेथ्रिनविरुद्ध निवडक दबावाच्या विकासाचे प्राथमिक संकेत देतात. दुर्दैवाने, CDC बॉटल बायोएसे वापरून मिळवलेला, या प्रदेशासाठीचा ऐतिहासिक संवेदनशीलता डेटा तुलनेसाठी उपलब्ध नाही; मागील सर्व अभ्यासांमध्ये WHO कीटकनाशक-मिश्रित कागद वापरून पी. अर्जेंटिपेसच्या संवेदनशीलतेचे निरीक्षण केले गेले आहे. WHO टेस्ट स्ट्रिप्समधील कीटकनाशकांचे निदानात्मक डोस हे मलेरिया वाहकांविरुद्ध (ॲनोफिलीस गॅम्बिया) वापरण्यासाठी शिफारस केलेले कीटकनाशकांचे ओळख सांद्रता आहेत, आणि या सांद्रतांची वाळूमाशीसाठीची कार्यात्मक उपयोज्यता अस्पष्ट आहे कारण वाळूमाशी डासांपेक्षा कमी वेळा उडते आणि बायोएसेमध्ये सब्सट्रेटच्या संपर्कात जास्त वेळ घालवते [23].
नेपाळमधील व्हीएल (VL) स्थानिक भागात १९९२ पासून सँडफ्लाय नियंत्रणासाठी अल्फा-सायपरमेथ्रिन आणि लॅम्डा-सायहॅलोथ्रिन या एसपी (SPs) सोबत आलटून पालटून सिंथेटिक पायरेथ्रॉइड्स वापरले जात आहेत [31], आणि बांगलादेशमध्ये २०१२ पासून डेल्टामेथ्रिन देखील वापरले जात आहे [32]. ज्या भागात सिंथेटिक पायरेथ्रॉइड्सचा दीर्घकाळ वापर केला गेला आहे, तेथील सिल्व्हरलेग्ड सँडफ्लायच्या वन्य प्रजातींमध्ये फेनोटाइपिक प्रतिकारशक्ती आढळून आली आहे [18, 33, 34]. इंडियन सँडफ्लायच्या वन्य प्रजातींमध्ये एक नॉन-सिनोनिमस म्युटेशन (L1014F) आढळून आले आहे आणि ते डीडीटीच्या प्रतिकारशक्तीशी संबंधित आहे, जे सूचित करते की पायरेथ्रॉइड प्रतिकारशक्ती आण्विक स्तरावर उद्भवते, कारण डीडीटी आणि पायरेथ्रॉइड (अल्फा-सायपरमेथ्रिन) दोन्ही कीटकांच्या मज्जासंस्थेतील एकाच जनुकाला लक्ष्य करतात [17, 34]. त्यामुळे, निर्मूलन आणि निर्मूलनोत्तर काळात सायपरमेथ्रिन संवेदनक्षमतेचे पद्धतशीर मूल्यांकन आणि डासांच्या प्रतिकारशक्तीवर देखरेख ठेवणे आवश्यक आहे.
या अभ्यासाची एक संभाव्य मर्यादा अशी आहे की आम्ही संवेदनशीलता मोजण्यासाठी CDC व्हायल बायोएसे वापरला, परंतु सर्व तुलनांमध्ये WHO बायोएसे किट वापरून केलेल्या मागील अभ्यासांमधील निकालांचा वापर केला गेला. दोन बायोएसेचे निकाल थेट तुलना करण्यायोग्य नसतील कारण CDC व्हायल बायोएसे निदान कालावधीच्या शेवटी नॉकडाउन मोजतो, तर WHO किट बायोएसे संपर्कात आल्यानंतर २४ किंवा ७२ तासांनी मृत्यूदर मोजतो (नंतरचे हळू-कार्य करणाऱ्या संयुगांसाठी) [35]. दुसरी संभाव्य मर्यादा म्हणजे या अभ्यासातील IRS गावांची संख्या, एका नॉन-IRS आणि एका नॉन-IRS/माजी IRS गावाच्या तुलनेत. आपण असे गृहीत धरू शकत नाही की एका जिल्ह्यातील वैयक्तिक गावांमध्ये आढळलेली डासांच्या वाहक संवेदनशीलतेची पातळी बिहारमधील इतर गावे आणि जिल्ह्यांमधील संवेदनशीलतेच्या पातळीचे प्रतिनिधित्व करते. भारत ल्युकेमिया विषाणूच्या निर्मूलनोत्तर टप्प्यात प्रवेश करत असताना, प्रतिकारशक्तीचा लक्षणीय विकास रोखणे अत्यावश्यक आहे. विविध जिल्हे, तालुके आणि भौगोलिक क्षेत्रांमधील सँडफ्लायच्या लोकसंख्येतील प्रतिकारशक्तीचे जलद निरीक्षण करणे आवश्यक आहे. या अभ्यासात सादर केलेला डेटा प्राथमिक आहे आणि कमी सँडफ्लाय लोकसंख्या राखण्यासाठी आणि ल्युकेमिया व्हायरस निर्मूलनास समर्थन देण्यासाठी वेक्टर नियंत्रण कार्यक्रमांमध्ये सुधारणा करण्यापूर्वी या भागांमध्ये पी. अर्जेंटाइप्सच्या संवेदनशीलता स्थितीबद्दल अधिक विशिष्ट कल्पना मिळविण्यासाठी जागतिक आरोग्य संघटनेने [35] प्रकाशित केलेल्या ओळख एकाग्रतेशी तुलना करून त्याची पडताळणी केली पाहिजे.
ल्युकोसिस विषाणूचा वाहक असलेला पी. अर्जेंटिप्स (P. argentipes) हा डास, अत्यंत प्रभावी सायपरमेथ्रिनला प्रतिकार करण्याची सुरुवातीची लक्षणे दाखवू शकतो. रोगवाहक नियंत्रण उपायांचा साथीच्या रोगावरील परिणाम टिकवून ठेवण्यासाठी पी. अर्जेंटिप्सच्या वन्य प्रजातींमधील कीटकनाशक प्रतिकारावर नियमित देखरेख ठेवणे आवश्यक आहे. कीटकनाशक प्रतिकाराचे व्यवस्थापन करण्यासाठी आणि भारतातून ल्युकोसिस विषाणूचे निर्मूलन करण्यास साहाय्य करण्यासाठी, वेगवेगळ्या कार्यपद्धती असलेल्या कीटकनाशकांची अदलाबदल करणे आणि/किंवा नवीन कीटकनाशकांचे मूल्यांकन व नोंदणी करणे आवश्यक आणि शिफारसीय आहे.